Determinación simultánea de efavirenz, emtricitabina y tenofovir por HPLC aplicadaa equivalencia terapéutica in vitro

Abstract

Este estudio tuvo como objetivo validar un método analítico por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC) para la cuantificación simultánea de efavirenz, emtricitabina y tenofovir disoproxil fumarato en tabletas de combinación fija, como base para base para la evaluación de la bioequivalencia terapéutica in vitro. Se emplearon equipos HPLC Agilent 1100 con detector UV y sistema de disolución Varian 7010. La validación incluyó pruebas de linealidad, precisión, exactitud, límites de detección y cuantificación, influencia del filtro y especificidad. La metodología cumplió los criterios establecidos en un rango lineal de 24.0 a 144.0μg/mL para efavirenz, 8.0 a 48.0μg/mL para emtricitabina y 12.0 a 72.0μg/mL para tenofovir, y coeficientes de determinación superiores a 0.9988. Las desviaciones estándar relativas fueron menores al 3.0% en todas las evaluaciones. El método fue aplicado al análisis de perfiles de disolución en medios a pH 1.2, 4.5 y 6.8. Se encontró que tenofovir presentó una disolución rápida(>85% en 30 minutos), mientras que efavirenz y emtricitabina mostraron baja disolución. Se concluye que el método es robusto, confiable y útil para estudios de control de calidad y disolución comparativa, aunque se recomienda el uso de medios alternativos como laurilsulfato de sodio al 2% para mejorar la solubilidad de efavirenz y emtricitabina.

This study aimed to validate a high-performance liquid chromatography (HPLC) analytical method for the simultaneous quantification of efavirenz, emtricitabine, and tenofovir disoproxil fumarate in fixed-dose combination tablets, as a basis for evaluatingvitro therapeutic equivalence. HPLC Agilent 1100 with UV detector and Varian 7010 dissolution system were used. The validation included linearity, precision, accuracy, detection and quantification limits, filter influence, and specificity. The method met all acceptance criteria within linear ranges of 24.0 to 144.0 μg/mL for efavirenz, 8.0 to 48.0 μg/mL for emtricitabine, and 12.0 to 72.0 μg/mL for tenofovir, with determination coefficients above 0.9988. Relative standard deviations were below 3.0% in all evaluations. The method was applied to dissolution profile analyses in pH 1.2, 4.5, and 6.8 media. Results showed that tenofovir dissolved rapidly (>85% in 30 minutes), whereas efavirenz and emtricitabine showed poor dissolution. It is concluded that themethod is robust, reliable, and suitable for quality control and comparative dissolution studies. However, the use of alternative media such as 2% sodium lauryl sulfate is recommended to improve the solubility of efavirenz and emtricitabine..