Estimación de dosis génica mediante PCR multiplex y electroforesis capilar fluorescente en posibles portadoras de deleciones en el gen de la distrofina, C.R., 1998-2000

Abstract

Objetivo: Estimar la dosis génica en el gen de la distrofina a mujeres a riesgo de ser portadoras de deleciones. Sitio de realización: INISA y Escuela de Biología, Universidad de Costa Rica. Materiales y métodos: Se obtuvo ADN de 15 mujeres, emparentadas por línea materna con pacientes afectados con DMD o BMD causadas por deleciones en el gen de la distrofina, y que por lo tanto podrían ser portadoras de esas mutaciones, para amplificar de 7 a 9 regiones del gen por medio de PCR-múltiplex. Para estimar la dosis génica, se marcó uno de los imprimadores (el F) de cada par con el fluorocromo 6-FAM; los productos de amplificación se separaron y se cuantificaron por electroforesis capilar fluorescente. Resultados: Todas las posibles portadoras mostraron dosis génicas como las de mujeres sin deleciones. Conclusiones: El resultado indica que todos los pacientes son producto de mutaciones de novo, lo que es inesperado, pues datos de otros países muestran que ese es el caso de a sólo 113 de los pacientes. Además, la evaluación ofrece mejores elementos de juicio para brindar consejo genético.