Validación experimental del fenómeno de compensación de dosis génica del oncogén Myc en líneas celulares de cáncer de colon aneuploide del panel NCI-60

Abstract

El cáncer se caracteriza por una proliferación celular descontrolada, capacidad propagativa y alteraciones genómicas significativas, como mutaciones en proto-oncogenes. Entre estos, Myc destaca por su sobreexpresión en la mayoría de los tipos de cáncer, donde actúa como un poderoso factor transcripcional, regulando la proliferación, diferenciación y metabolismo celular. En tumores con alta inestabilidad genómica y aneuploidía, las células tumorales parecen emplear mecanismos compensatorios para evitar los efectos perjudiciales de la poliploidía, controlando su expresión a niveles no letales. Investigaciones in silico han propuesto que oncogenes como Myc están sujetos a mecanismos de compensación mediados por microARNs (miARNs), los cuales forman circuitos de retroalimentación negativa que estabilizan su expresión. A partir de este marco teórico, el objetivo principal de este estudio fue validar experimentalmente si el bloqueo de los miR17, miR19a y miR20a altera la compensación Myc en células aneuploides de cáncer. Estas células, con poliploidías para Myc, fueron transfectadas con un plásmido, buscando una expresión estable, que contenía una versión exógena de Myc sin la región 3'UTR, para evitar el control por miARNs y una codificación diferencial de los nucleótidos, lo que permitió diferenciar entre los transcritos endógenos y exógenos. Mediante la adaptación de la técnica génica de tug-of-war, se evaluó cómo la sobreexpresión de exo-Myc afecta la expresión relativa endógena y si el bloqueo de estos miARNs con anti-miRs interfiere con el mecanismo de compensación. Los resultados mostraron que el bloqueo de los miR17, miR19a y miR20a mediante un pool de anti-miARNs produjo un aumento en la expresión de Myc endógeno en las líneas celulares wild-type (HT29 y SW620), apoyando la hipótesis de que estos miARNs son clave en la regulación de la compensación de dosis génica y al inhibirlos son incapaces de ejercer su función regulatoria. En las células wild-type, el aumento en la expresión de Myc fue dosis-dependiente, observándose los mayores efectos a concentraciones de 20 y 30 μM, respectivamente. Sin embargo, en las líneas celulares estables transfectadas con Myc exógeno, el efecto fue menos pronunciado, lo que sugiere un sistema de compensación más robusto o la necesidad de dosis más altas de inhibidores. Estos hallazgos sugieren que el bloqueo de la compensación de dosis génica podría ser una estrategia terapéutica prometedora en el tratamiento de tumores con amplificaciones de Myc, al inducir desequilibrios letales en la expresión del oncogén.