ReV. Cost. A-34 c. 	 1 :1 6 ig91: 
01.1 
      
DETERMINACION INMUNOENZIMATICA DE LOS NIVELES 
SERICOS DE INMUNOGLOBULINA E 
EN NODS ASMATICOS DE LA 
MESETA CENTRAL DE COSTA RICA01611" " 144 
IN: S A 
Bruno Lomontel , Pilar 	 FlorQuesada\484, 	 006  
breeetitat* 
RESUMEN 
Se describer los niveles de IgE serica en una 
muestra de 69 ninos con diagnastico de 
asma bronquial, de la meseta central de 
Costa Rica, asicomo de 33 ninos aparente-
mente sanos, sin historia clThica de alergias, 
y de 20 adultos donadores de sangre. La 
comparacion mostrd un mayor promedio de 
IgE serica en el grupo de ninos asmaticos 
con respecto al grupo control, asicomo una 
mayor frecuencia de niveles de 1gE muy 
aumentados ((1000 kU/I) en los ninos as-
maticos. Los valores de IgE hallados en los 
ninos aparentemente sanos son mas simi-
tares a los descritos en poblaciones de 
palses tropicales qua de palses de Europa y 
Norteamerica. Se realize) una comparacion 
entre un metodo inmunoenzimatico y uno 
radioinmune para la cuantificacion de IgE y 
se obtuvo un coeficiente de correlacion de 
0,947. (Rev. Cost. Cienc. Med. 1991; 12(1, 
2): 	 ). 
1 	 Institute Clodomiro Picado, Facultad de 
Microbiologia, Universidad de Costa Rica. 
2 	 Institute de Investigaciones en Salud y 
Facultad de Microbiologia, Universidad 
de Costa Rica. 
3 	 Laboratorio de Inmunoanalisis, Seccion 
de Medicina Nuclear, Hospital San Juan 
de Dios, CCSS, San Jose, Costa Rica. 
Correspondencia: Dr. Bruno Lomonte, Institute 
Clodomiro Picado, Universidad de Costa Rica. 
INTRODUCCION 
La inmunoglobulina E (IgE), fue aislada por 
primera vez en 1966, y seguidamente fue 
identificada como la class de inmunoglo-
bulina que media las reacciones de hiper-
sensibilidad tipo I (revisado por Johansson 
(7). El hallazgo de un mieloma IgE permitio la 
produccion de antisueros anti-IgE, lo que a 
su vez propicio el desarrollo de tecnicas 
inmunoquimicas para su cuantificacion (7). 
Dada la baja concentracion de IgE en suero 
normal (alrededor de 500.000 veces manor 
que la de lgG), los metodos para su cuan-
tificacion requieren de una alta sensibilidad 
fisica (7,19). Fundamentalmente se utilizan 
motodos radioinmunes e inmunoenzima-
ticos. En la actualidad, Ia tecnologia de 
hibridomas (11) ha permitido la obtencion de 
anticuerpos monoclonales contra la cadena 
epsilon humana, de gran utilidad en las 
tecnicas mencionadas. 
La cuantificacion de IgE es parte de la eva-
luacion integral de los pacientes en estudio 
por padecimientos alergicos (20). El asma 
bronquial extrinsecafue una de las primeras 
entidades clinicas en que la determinacian 
de IgE hallo utilidad diagnostica (7). Aparte 
de los trastornos alergicos, otras causas de 
elevaciOn en Ia IgE serica son las infecciones 
parasitarias, especialmente por helmintos, 
asi como algunas infecciones virales, por 
ejemplo por virus herpes, parainfluenza, 
respiratorio sincicial, y Epstein-Barr (9). Dada 
que los niveles de IgE (asi como de otras 
inmunoglobulinas) en Ia poblacion de 
distintas regiones geograficas pueden variar 
significativamente par factores geneticos y/o 
1 
ambientales (2, 3, 4, 12, 14), y dada la 
escasa information publicada sobre los 
niveles de IgE en Ia poblacicincostarricense, 
consideramos de interes investigar este 
parametro en un grupo de ninos con diag-
nostic° de asma bronquial y un grupo de 
ninos "control", aparentemente sanos y sin 
historia de alergias, de la meseta central de 
Costa Rica. Tambien se determine la IgE en 
un grupo de veinte adultos donadores de 
sangre. Ala vez, se realize una comparacion 
entre un metodo inmunoenzimatico y un 
metodo radioinmune para esta determina-
tion, con el fin de evaluar su correlation. 
MATERIAL Y METODOS 
El grupo de ninos con diagnostic° de asma 
bronquial consistici de pacientes preesco-
lares atendidos en el Cuarto de Nebuliza-
ciones del Servicio de Consulta Externa del 
Hospital Nacional de Ninos, San Jose, Costa 
Rica. Como grupo control se selecciono a 33 
ninos aparentemente sanos, que acudieron 
a consultas de control en Ia Clinica "Dr. Solon 
Nimez", Hatillo (San Jose, Costa Rica) sin 
historia de padecimientos alergicos ni asma, 
y que presentaran un hemograma normal. 
Tambien se incluyo una muestra de veinte 
adultos qua se presentaron a donar sangre 
en el Banco del hospital citado. Nose investi-
g° la presencia de parasitos intestinales u 
otros agentes infecciosos en ninguno de los 
grupos estudiados. No se hizo diferencias 
Po, sexo en los grupos, dado que otros 
investigadores han hallado que este factor 
no tiene influencia en la concentration de IgE 
(1,10). 
Las muestras de suero fueron mantenidas a 
—20°C hasta su analisis (tres mesas). Para Ia 
determination de IgE serica total se utilize un 
metodo inmunoenzimatico ("IgE EIA": Phar-
macia Diagnostics, Uppsala, Suecia) basado 
en una captura en fase solida con un ant-
cuerpo monoclonal anti-IgE y detection 
simultanea con el mismo anticuerpo conju-
gado con fosfatasa alcalina. La lectura del 
producto final se realize a 420 nm en un 
espectrofotometro Shimadzu (UV-160: 
Shimadzu Corporation, Japan). Los estan- 
dares para la curva de referencia se corrieron 
por triplicado, asi como un suero control 
precalibrado (Pharmacia). Las concentracio-
nes de IgE de las muestras estudiadas se 
obtuvieron por interpolacion en la curva de 
referencia, mediante Ia regresion logaritmica 
aplicada a los dos puntos mas proximos a Ia 
iectura de Ia muestra. Tanto los estandares 
de referencia como las muestras en estudio 
fueron analizados simultaneamente. 
Para fines comparativos, se analizo 108 
muestras concomitantemente por un metodo 
radioinmune ("IRMA-count total 19E"; 
Diagnostic Products Corporation, California, 
EUA). En breve, Ia tecnica se basa en una 
union initial entre Ia IgE de Ia muestra y un 
anticuerpo monoclonal anti-IgE marcado con 
un ligando, en fase Iiquida. Los complejos 
son unidos a una fase sOlida recubierta con el 
ligando a traves de un puente con anticuer-
pos antiiigando, y posteriormente la IgE 
unida es detectada con dos anticuerRos mo-
noclonales anti-IgE marcados con 151. Las 
curvas de referencia se establecieron con los 
estandares provistos par el fabricante. 
Las concentraciones de IgE fueron transfor-
madas logaritmicamente para aproximar una 
curva normal (9). La comparacion de 
promedios se realizO mediante la prueba de t 
de Student, utilizando el programa SPSS. 
RESULTADOS 
La curva de referencia obtenida por el me-
todo inmunoenzimatico comercial ("IgE EIA") 
fue tipica, con una alta reproducibilidad de 
las lecturas de los estandares. El suero 
control dio un valor dentro del ambito espe-
rado, segun las instrucciones del fabricante. 
Los valores de IgE, tanto de los ninos asmati-
cos como de los normales, se distribuyeron 
en un ambito amptio. El Cuadro 1 resume los 
principales resultados correspondientes a 
las distintas muestras estudiadas. Los 
adultos donadores de sangre presentaron 
una concentration promedio de IgE mayor 
que la de los ninos aparentemente sanos 
(Cuadro 1). Las distribuciones de frecuen-
cias en dichos grupos se comparan en la Fi-
gura 1. En los ninos con asma bronquiaf 
k 
2 
fue mas frecuente hailer niveles de IgE altos, 
mayores de 1000 kU/I, que en los ninos con-
trol. La comparaciOn de promedios entre 
estos dos grupos, mediante t de Student, 
indica que Ia diferencia es altamente signi-
ficative (p<0,00001). Por otra parte, Ia corn-
paracion entre el metodo inmunoenzimatico 
y el radioinmune en 108 muestras analiza-
das, mostro un coeficiente de correlacion de 
0,947 (Figura 2). 
DISCUSION 
La comparacion de los promedios obser-
vados en los dos grupos mostro un mayor 
nivel de IgE serica en los ninos asmaticos. 
Adernas, la distribuciOn de frecuencias 
mostro una clara tendencia a encontrar en 
los pacientes asmaticos un mayor niimero de 
casos con niveles muy elevados de lgE, 
mayores de 1000 kU/1. Esto coincide con los 
estudios descritos en la literature (6, 7). En 
un pequeno numero del grupo de ninos as-
maticos, se encontro niveles bajos de IgE (ej. 
<10 kU/1; Figura 1), lo cual podria deberse a 
casos de asma intrinseca. En Costa Rica, 
Frajman et al. (5) describieron los niveles de 
IgE serica en un grupo de 20 pacientes 
alergicos adultos y 20 controles normales, en 
un estudio de varios aspectos de su funcion 
inmunecelular. Mientras que los controles se 
mantuvieron por debajo de 80 kW de IgE, los 
individuos alergicostuvieron un promedio de 
626 kU/I (5). 
En terminos generales, pare una adecuada 
interpretation de los analisis de laboratorio, 
es importante estudiar la propia poblacion y 
no guiarse simple mente por los datos des-
critos en la literature, en su mayoria obteni-
dos en poblaciones de paises industriali-
zados. El caso de la IgE es un ejemplo de 
variabilidad importante en distintas pobla-
ciones. Los promedios geornetricos de IgE 
en Estados Unidos y paises escandinavos, 
en ninos sanos, tienden a estar en airededor 
de 8-14 kU/1(1,10). Un estudio en escolares 
del sur de Italia mostro un promedio de 21 
kU/I (12), En paises tropicales como Vene-
zuela, se ha descrito promedios de 51 y 74 
kU/I para ninos sanos de 7y 9 arms, respecti- 
vamente (16), cif ras similares a las observe-
das en el presente estudio. Rosario et aL (18) 
describen un promedio de 192 kU/I de IgE en 
ninos de Brasil. Un extremo notable lo consti-
tuyen los informes sobre las poblaciones 
indigenes Waorani en Ecuador, con prome-
dios de mas de 11000 kU/I de IgE en adultos 
(4, 8,14), asf como de pobladores del Tibet, 
con mas de 2900 kU/I en adultos (4). Entre 
algunos aspectos interesantes que infiuyen 
sobre los niveles de IgE, edemas de los clasi-
camente descritos como estados alergicos e 
infecciones helminticas, estan el estado 
nutricional (17), el grupo etnico (9), el nivel 
socioeconomic° (13, 15), y at5n habitos como 
el fumed° (20). 
Por otra parte, la comparacion entre el mato-
do inmunoenzimatico y el radioinmune per-
mitio corroborar que existe una correlaciOn 
adecuada, tal coma lo describen algunos 
fabricantes (ej. Pharmacia) e investigadores 
(20). La mayor estabilidad de los reactivos, el 
menor peligro en su manejo, Ia simplicidad 
del metodo y su lecture final, hacen mucho 
mas conveniente el inmunoensayo enzima-
tico que el radioisotopic°. 
Los resultados expuestos en este trabajo con 
respecto a nines y adultos aparentemente 
sanos no pretender ser valores de referencia 
pare Ia determinacion de IgE serica. Sin 
embargo, se consider6 conveniente divulger--
los como un informe sobre este variable de 
laboratorio, en una muestra de la poblacion 
costarricense. Seria importante realizar 
estudios futuros, diserlados para establecer 
puntos de referencia exactos pare este de-
terminaciOn, en la poblaciOn costarricense. 
AGRADECIMIENTOS 
Agradecemos a los colegas Drs. Marianela 
Trejos, Jenny Montero y Luis del Valle, por su 
colaboraciOn en este estudio, al Sr. Alvaro 
Montenegro por su ayuda en el analisis esta-
distico, asi como a los Drs. S.G.O. Johans-
son (Institute Karolinska), Luisa Businco 
(Universidad de Roma), B. Bjorkstan 
(Universidad de la Salud de Linkoping) y a la 
compafifa Pharmacia Diagnostics por su 
apoyo en varios aspectos de este trabajo. 
3 
B. Lomonte y P. Salas son miembros del Pro- 	 res del Consejo Nacional de Investigaciones 
grama Financiero de Apoyo a Investigado- 	 Cientificas y TecnolOgicas (CONICIT). 
CUADRO 1 
CONCENTRACION SERICA DE IgE EN UNA MUESTRA DE NIFJOS NORMALES, 
ASMATICOS Y DE ADULTOS NORMALES DE COSTA RICA, DETERMINADA MEDIANTE 
INMUNOENSAYO ENZIMATICO 
Grupo 	 n 	 edad 
(anos) 
ConcentraciOn IgE (kU/0" 
 
 
Promedio 	 ambito 
geometric° 
Nirios control 33 6(1-11)' 74 5-1738 
Milos asmaticos 69 4 (1- 7)* 308 1.3467 
Adultos 20 >18 249 30-3070 
• Promedio (Ambito). 
1 U =2,4 ng 19E. 
ABSTRACT 
Serum IgE levels were determined in 69 
Costa Rican children with bronchial asthma, 
as well as in 33 apparently healthy children 
without clinical history of allergy, and in 20 
blood donors. A significantly higher mean IgE 
level was found in asthmatic children when 
compared to control children. Also, frequency 
distributions in these two groups indicated a 
higher number of individuals with very high 
IgE concentration (>1000 KU/I) in the 
asthmatic group. Serum IgE levels in 
apparently healthy children are more similar 
to those described in tropical countries than 
in Europe or North America. A comparison 
between an immunoenzymatic and a 
radioimmune method for IgE quantitation 
gave a correlation coefficient of 0.947. 
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c 
10 < 100 	 100 < 1000 
Concentracion IgE (kU/I) 
N\N Asma 
10 
1 c10 
Control 
Fr
ec
u
e
n
c
ia
 
 
r
e
la
ti
va
 
 
(%
)  
50-
40 - 
30-
20- 
60 
Figura 1. Comparacion de la distribucion de trecuencias de los niveles de IgE serica (kU/I) en 
ninos asmaticos (n=69) y controles (n=33). 
3.5 	  
3- 
LC 2.5- 
rr 
; 2- 
w 2' 1.5- 
0) g.) 
0.5- 
1 
	
2 
	
3 
	
4 
Log IgE (kW), ELISA 
Figura 2. Analisis de correlacion entre un metodc inmunoenzimatico (ELISA: "IgE-E1A") y un 
metodo radioinmune (R1A: "IRMA-count total IgE") pars la cuantificaciOn de IgE serica. n=108, 
r=0,947. 
6 
0 w 
	
43 
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