UNIVERSIDAD DE COSTA RICA SISTEMA DE ESTUDIOS DE POSGRADO “COMPARACIÓN DE DOS TUBOS DE EXTRACCIÓN DE SANGRE EN LA DETERMINACIÓN BIOQUÍMICA DE 21 ANALITOS: TUBO CON GEL SEPARADOR HONGYU MEDICAL® Y TUBO SIN GEL SEPARADOR VACUETTE®”. Trabajo final de investigación aplicada sometida a la consideración de la Comisión del Programa de Estudios de Posgrado en Microbiología para optar al grado y título de Especialista en Química Clínica. ANA LORELY BLANCO CHAVES CARNET: A80944 Ciudad Universitaria Rodrigo Facio, Costa Rica 2020 Dedicatoria A Dios por permitirme cumplir mis metas. A Harold, a mis padres y familia que siempre están a mi lado apoyándome, son luz e inspiración para cumplir mis sueños. ii Agradecimientos A la Dra. Marianela Vargas por ser mi guía en este proceso de estudio e investigación. A la Dra. Ileana Holst y al Dr. Manuel Jiménez por asesorarme y guiarme. Al Dr. Marlon Matamoros y a la empresa Capris Médica S.A. por la colaboración brindada con la donación de los reactivos e insumos necesarios para ejecutar la investigación. A la Dra. Olga Marta González por su apoyo, especialmente durante la Especialidad. A Maribel y Marianela por su ayuda en la ejecución de este proyecto. iii iv Tabla de Contenidos Dedicatoria......................................................................................................................... ii Agradecimientos ...............................................................................................................iii Tabla de Contenidos ........................................................................................................... v Resumen ......................................................................................................................... viii Índice de Tablas ................................................................................................................ ix Índice de Figuras ................................................................................................................ x Lista de Abreviaturas ...................................................................................................... xiv 1. Introducción ............................................................................................................... 1 1.1. Antecedentes ........................................................................................................ 1 1.1.1. Variables preanalíticas en los análisis bioquímicos ........................................ 1 1.1.2. Desarrollo de nuevas tecnologías en tubos para la extracción de sangre ......... 3 1.1.3. Tubos con gel separador ................................................................................ 4 1.1.4. Interferencias por componentes del gel separador .......................................... 6 1.1.5. Comparación de métodos .............................................................................. 8 1.1.6. Validación de tubos de extracción de muestras de sangre ............................ 10 2. Justificación ............................................................................................................. 12 3. Planteamiento del problema ...................................................................................... 13 4. Objetivos .................................................................................................................. 14 v 4.1. Objetivo General ................................................................................................ 14 4.2. Objetivos específicos ......................................................................................... 14 5. Metodología ............................................................................................................. 15 5.1. Analitos a evaluar y muestras ............................................................................. 15 5.2. Analizador empleado ............................................................................................. 17 5.3. Recolección y análisis de datos .............................................................................. 18 6. Resultados y discusión.............................................................................................. 21 6.1. Metabolitos............................................................................................................ 21 6.1.1. Glucosa........................................................................................................... 21 6.1.2. Nitrógeno Ureico ............................................................................................ 23 6.1.3. Creatinina ....................................................................................................... 25 6.1.4. Ácido Úrico .................................................................................................... 26 6.1.5. Bilirrubina total .............................................................................................. 28 6.2. Lípidos .................................................................................................................. 29 6.2.1. Triglicéridos ................................................................................................... 29 6.2.2. Colesterol ....................................................................................................... 30 6.2.3. HDL colesterol ............................................................................................... 31 6.3. Electrolitos ............................................................................................................ 33 6.3.1. Sodio .............................................................................................................. 33 6.3.2. Cloruro ........................................................................................................... 34 vi 6.3.3. Potasio ............................................................................................................ 35 6.3.4. Calcio ............................................................................................................. 36 6.3.5. Magnesio ........................................................................................................ 38 6.3.6. Fósforo ........................................................................................................... 39 6.4. Enzimas ................................................................................................................. 41 6.4.1. AST ................................................................................................................ 41 6.4.2. ALT ................................................................................................................ 42 6.4.3. ALP ................................................................................................................ 43 6.4.4. GGT ............................................................................................................... 44 6.4.5. LDH ............................................................................................................... 46 6.5. Proteínas................................................................................................................ 47 6.5.1. Proteínas totales .............................................................................................. 47 6.5.2. Albúmina ........................................................................................................ 48 Conclusiones .................................................................................................................... 54 Referencias ...................................................................................................................... 55 Anexos ............................................................................................................................. 59 Anexo 1........................................................................................................................ 59 Anexo 2........................................................................................................................ 61 Anexo 3........................................................................................................................ 73 vii Resumen Algunos componentes de los tubos de extracción de sangre pueden generar interferencia en los análisis rutinarios, de ahí la importancia de validar dichos materiales antes de ser implementados en el uso clínico. Se realizó una comparación por regresión lineal entre los tubos con gel separador Hongyu Medical® y el tubo sin gel separador Vacuette® por medio del análisis bioquímico de 21 analitos. Se determinó que los resultados obtenidos en ambos tubos presentan buena correlación y se demuestra la idoneidad de los tubos con gel separador para el uso rutinario en las determinaciones bioquímicas. viii Índice de Tablas Tabla 1 Características de la metodología empleada para la determinación de los 21 analitos en el analizador AU 680 de Beckman Coulter. .................................................... 16 Tabla 2 Error total aceptado según requerimientos de calidad de CLIA y RCPA utilizado según el analito. ............................................................................................................... 20 Tabla 3 Resumen de análisis de regresión lineal y error sistemático proporcional y constante para 21 analitos, al comparar los tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .................................................................................................................. 50 Tabla 4 Porcentaje de error obtenido en la comparación de los tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 51 ix Índice de Figuras Figura 1 Componentes de los tubos para extracción de sangre. ......................................... 4 Figura 2 Gráfico de regresión lineal para Glucosa al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 21 Figura 3 Gráfico de Bland – Altman para Glucosa al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 22 Figura 4 Gráfico de regresión lineal para Nitrógeno Ureico al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 23 Figura 5 Gráfico de Bland – Altman para Nitrógeno Ureico al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................. 24 Figura 6 Gráfico de regresión lineal para Creatinina al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 25 Figura 7 Gráfico de Bland – Altman para Creatinina al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 25 Figura 8 Gráfico de regresión lineal para Ácido úrico al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 26 Figura 9 Gráfico de Bland – Altman para Ácido Úrico al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 27 Figura 10 Gráfico de regresión lineal para Bilirrubina Total al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................. 28 Figura 11 Gráfico de Bland – Altman para Bilirrubina Total al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................. 28 x Figura 12 Gráfico de regresión lineal para Triglicéridos al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 29 Figura 13 Gráfico de Bland – Altman para Triglicéridos al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 30 Figura 14 Gráfico de regresión lineal para Colesterol al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 30 Figura 15 Gráfico de Bland – Altman para Colesterol al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 31 Figura 16 Gráfico de regresión lineal para HDL colesterol al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 31 Figura 17 Gráfico de Bland – Altman para HDL colesterol al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 32 Figura 18 Gráfico de regresión lineal para Sodio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ........................................................................................... 33 Figura 19 Gráfico de Bland – Altman para Sodio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ........................................................................................... 33 Figura 20 Gráfico de regresión lineal para Cloruro al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 34 Figura 21 Gráfico de Bland – Altman para Cloruro al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 34 Figura 22 Gráfico de regresión lineal para Potasio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 35 xi Figura 23 Gráfico de Bland – Altman para Potasio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 35 Figura 24 Gráfico de regresión lineal para Calcio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 36 Figura 25 Gráfico de Bland – Altman para Calcio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 37 Figura 26 Gráfico de regresión lineal para Magnesio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 38 Figura 27 Gráfico de Bland – Altman para Magnesio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 38 Figura 28 Gráfico de regresión lineal para Fósforo al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 39 Figura 29 Gráfico de Bland – Altman para Fósforo al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 40 Figura 30 Gráfico de regresión lineal para AST al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 41 Figura 31 Gráfico de Bland – Altman para AST al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 41 Figura 32 Gráfico de regresión lineal para ALT al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 42 Figura 33 Gráfico de Bland – Altman para ALT al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 43 xii Figura 34 Gráfico de regresión lineal para ALP al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 43 Figura 35 Gráfico de Bland – Altman para ALP al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 44 Figura 36 Gráfico de regresión lineal para GGT al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 44 Figura 37 Gráfico de Bland – Altman para GGT al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 45 Figura 38 Gráfico de regresión lineal para LDH al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 46 Figura 39 Gráfico de Bland – Altman para LDH al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. .......................................................................................... 46 Figura 40 Gráfico de regresión lineal para Proteínas Totales al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................. 47 Figura 41 Gráfico de Bland – Altman para Proteínas Totales al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................. 48 Figura 42 Gráfico de regresión lineal para Albúmina al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 48 Figura 43 Gráfico de Bland – Altman para Albúmina al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. ............................................................................. 49 xiii Lista de Abreviaturas ALP: Fosfatasa alcalina ALT: Alanino aminotransferasa AST: Aspartato aminotransferasa CCSS: Caja Costarricense de Seguro Social Ck mb: Creatina quinasa MB CLIA: Clinical Laboratory Improvement Amendments CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute EFLM WG-PRE: Working Group for Preanalytical Phase of European Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine GGT: Gamma glutamil transferasa HDL: Lipoproteínas de alta densidad, por sus siglas en inglés INCIENSA: Instituto Costarricense de Investigación y Enseñanza en Nutrición y Salud LDH: Lactato deshidrogenasa PEEDQC: Programa de Evaluación Externa del Desempeño en Química Clínica RCPA: Royal College of Pathologists of Australasia RIQAS: Esquema Internacional de Aseguramiento de la Calidad Randox xiv xv 1 1. Introducción 1.1. Antecedentes 1.1.1. Variables preanalíticas en los análisis bioquímicos El proceso de análisis de muestras en el laboratorio clínico se desarrolla a partir de diferentes fases (Ventura et al., 2007): • Fase preanalítica: todos aquellos procesos que se llevan a cabo desde que el personal médico realiza la solicitud, hasta que se ejecuta el análisis de la muestra. • Fase analítica: incluye todos los procedimientos que se realizan en el procesamiento de la muestra. • Fase postanalítica: una vez que se ha analizado la muestra, se realiza la validación de los resultados, y se genera el reporte respectivo. Todas estas fases han sido bien estudiadas con el paso de los años y son parte primordial dentro de los sistemas de aseguramiento de la calidad en los laboratorios clínicos (Hernández et al., 2018). Sin embargo, se estima que el mayor porcentaje de errores puede presentarse en la fase preanalítica, ya que se incluyen aquí gran cantidad de aspectos que van desde la solicitud de los análisis por parte del médico, las características y condiciones previas del paciente, el ingreso de las solicitudes en los sistemas de información, así como la recolección, transporte, almacenamiento y preparación de la muestra previo a su análisis (Ventura et al., 2007). Algunas partes del proceso preanalítico pueden resultar difícilmente controlables por parte del laboratorio clínico. Sin embargo, otros pasos como es la obtención de la muestra debe estar altamente estandarizada y controlada, de manera que se utilicen tubos de 2 recolección adecuados, se realice un correcto llenado de los mismos, se evite la contaminación de las muestras con soluciones intravenosas, tiempo óptimo de uso de torniquete, adecuada identificación del paciente y rotulación de la muestra, entre otros (Ventura et al., 2007; Hernández et al., 2018). Para el proceso de extracción de la muestra de sangre, en muchas ocasiones la selección de los dispositivos que se van a utilizar es un proceso subestimado, generalmente los materiales que se utilizan no son considerados dentro de las variables preanalíticas que influyen en los resultados que se reportan. Actualmente se conoce que diferentes aditivos o componentes de los tubos que se utilizan en la extracción, pueden alterar la estabilidad de los analitos, y por lo tanto ser una fuente de error preanalítico en las diferentes determinaciones que se realizan en el laboratorio, por lo tanto, deben ser evaluados antes de ser puestos en uso (Bowen y Remaley; 2014; Lippi et al., 2016). Es responsabilidad de los fabricantes realizar ensayos donde los tubos de extracción de sangre se estudien en diferentes entornos clínicos, así como en diferentes analizadores, de manera que se pueda detectar posibles sesgos y/o imprecisión en las pruebas, especialmente en analitos que de antemano se conoce que son inestables. Sin embargo, la “European Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (EFLM) – Working Group for Preanalytical Phase (WG-PRE)” recomienda que todo laboratorio, debe realizar una validación de los tubos de recolección de sangre nuevos que se vayan a adquirir, comparando con los tubos que se utilizaban anteriormente, de manera que se pueda determinar si existe sesgo o imprecisión en los análisis que pueda afectar los resultados (Lippi et al, 2016). 3 1.1.2. Desarrollo de nuevas tecnologías en tubos para la extracción de sangre A lo largo de los años, la necesidad de realizar diferentes análisis sanguíneos ha permitido el constante avance en la tecnología de los dispositivos que se utilizan en la extracción de sangre. La evolución en el diseño de los tubos ha permitido una mejora en la calidad y rapidez en la obtención de las muestras, así como un menor riesgo biológico para el personal de salud encargado del procedimiento. En el año 1949, Joseph Kleiner diseñó el primer tubo al vacío, el cual fue asignado a la empresa Becton Dickinson (Babakhani et al., 2018), y a partir de ahí se han ido desarrollando nuevas mejoras en el diseño, por ejemplo, el material plástico reemplazó al vidrio (Bowen y Remaley; 2014). Los tubos para extracción de sangre al vacío proporcionaron una alternativa bastante conveniente a la jeringa que anteriormente se usaba. Presentan la ventaja que extraen un volumen de muestra predeterminado y permite una mayor facilidad cuando se necesita obtener varias muestras, ya que solo requiere que se realice el cambio de tubo, lo que permite a su vez un menor riesgo biológico, tanto para el paciente como para el flebotomista (Bowen et al, 2010). Por otro lado, al cambiarse a material plástico, se disminuyó el tiempo de centrifugación, se redujo el riesgo de ruptura, el peso del material es más bajo y además es un material idóneo para procesos de autoclavado (Bowen et al, 2007). Como se detalla en la figura 1, los tubos de extracción de sangre contienen diferentes aditivos, tensoactivos, activadores de la coagulación, anticoagulantes, geles poliméricos separadores (Bowen y Remaley; 2014). Además, se cuenta con un sistema de tapones de goma especiales con un código específico de colores de acuerdo a los aditivos que contienen y la función o análisis para los que se pueden emplear, y se pueden encontrar en diferentes 4 tamaños, permitiendo también análisis con poca muestra en pacientes cuya recolección es complicada como en adultos mayores o niños (Babakhani et al., 2018). Figura 1 Componentes de los tubos para extracción de sangre. Fuente: Bowen, R., Remaley, A. (2014). Interferences from blood collection tube components on clinical chemistry assays. p. 32. A pesar de su aparente similitud, los tubos de extracción de sangre presentan variaciones en los materiales y aditivos utilizados entre los diferentes fabricantes, lo que podría incidir en el rendimiento de las pruebas que se realicen. En Estados Unidos los principales fabricantes de tubos son Becton Dickinson y Greiner Bio-One (Bowen y Remaley; 2014). 1.1.3. Tubos con gel separador En el año 1976, Becton Dickinson introdujo en los laboratorios los tubos con gel separador para suero sanguíneo (Babakhani et al., 2018). La implementación de geles separadores en los tubos de recolección de sangre para aislar el suero o plasma de los demás componentes de la sangre ha permitido un menor tiempo en el procesamiento de la muestra, 5 generan mayor cantidad de muestra disponible para el análisis, se producen menos aerosoles, es necesario solo un paso de centrifugación y la determinación se realiza en el tubo primario (Bowen y Remaley; 2014). Otra ventaja es que mejoran de forma importante la estabilidad de los analitos por lo que no es necesario separar alícuotas y se facilita el almacenamiento y transporte de las muestras (Bowen et al., 2010). Los geles separadores poliméricos son hechos a partir de líquidos viscosos, materiales orgánicos e inorgánicos, naturales o sintéticos y diversos agentes gelificantes que permiten que se genere la viscosidad, densidad y otras propiedades físicas que se deseen (Bowen et al., 2010). En condiciones ideales, los geles separadores deben mantener las características físicas y químicas durante el tiempo de uso indicado por el fabricante, y, además deben ser de naturaleza inerte a las sustancias que se requiere analizar (Bowen y Remaley, 2014). Generalmente se busca que la densidad específica de los geles separadores se encuentre entre 1.03 y 1.09 g/cm3, esto debido a que la densidad específica de suero y plasma varía desde 1.026 a 1.031 g/cm3 y la del coágulo desde 1.092 a 1.095 g/cm3, de manera que al centrifugar quede colocado entre ambos componentes y se pueda realizar una adecuada separación. Algunas situaciones especiales que causan altas densidades en la muestra como son la hiperproteinemia o pacientes a los que se les ha administrado medio de contraste radiológico pueden generar que después de la centrifugación el suero o plasma no quede por encima del gel, es decir este no quede separando los componentes sanguíneos (Bowen et al., 2010). 6 1.1.4. Interferencias por componentes del gel separador En condiciones ideales los componentes de los tubos para extracción de sangre como son el gel separador, no deberían causar ningún tipo de interferencia en los análisis de laboratorio, sin embargo, diferentes estudios han demostrado que si puede existir interacción con ciertos analitos, especialmente por efecto del tiempo de almacenamiento, temperatura, volumen de la muestra y velocidad de centrifugación inadecuada (Bowen et al., 2010). Los geles separadores pueden afectar los análisis por diferentes mecanismos, algunos analitos pueden adsorberse en el gel, también puede darse liberación de materiales que componen el gel, interaccionando con el analito o afectando físicamente el analizador, por ejemplo, cuando la sonda pipetea la muestra, o interferir en la unión a la fase sólida en los inmunoensayos que usan este sistema. Además, se ha visto que algunos componentes del gel pueden recubrir los electrodos, generando cambios en el potencial eléctrico y por ende en la concentración de analitos reportados, y en algunos casos, componentes del gel que pueden disolverse en la sangre afectando ciertos analitos (Bowen et al., 2010). Fenitoína, fenobarbital, carbamazepina, quinidina, lidocaína y progesterona son analitos que pueden absorberse en geles hidrofóbicos y, por lo tanto, obtener resultados falsamente disminuidos de la concentración de estos fármacos, hasta un 50% luego de 24 horas a 4 ºC. También se han reportado diferencias significativas entre los niveles de mioglobina y creatina quinasa MB (CK-MB) al usar tubos con gel separador y sin gel (Bowen y Remaley, 2014). En el caso del potasio, se ha visto que es posible que los glóbulos rojos superen la barrera separadora del gel y por lo tanto se pueden dar falsos aumentos en su medición. También se han detectado valores elevados de este analito posterior al almacenamiento de 7 más de 12 horas o después de que la muestra ha sido transportada. (Bowen y Remaley, 2014; Gawria, 2019). Con respecto al calcio se ha visto que se pueden presentar aumentos de la fracción ionizada, debido a la liberación de calcio del contenido del gel y por un cambio en el pH de la muestra debido a liberación de ácido (Çuhadar, 2013). Con respecto a ensayos que se realizan en la química clínica de rutina, se ha detectado una estabilidad reducida de la glucosa, lactato deshidrogenasa (LDH), aspartato amino transferasa (AST) y fosfato cuando se utilizan tubos con gel separador para la recolección de las muestras, y esto podría darse debido a que el suero no está completamente libre de células, aunque cuando existe esa barrera separadora. Algunas plaquetas y leucocitos podrían permanecer en la superficie del gel, así como algunos eritrocitos que podrían quedarse en el suero luego de la centrifugación (Gawria, 2019). Otro analito que puede presentar diferencias es la Proteína C reactiva, como lo encontraron Chang y colaboradores en el año 2003, donde se observaron valores más bajos de este analito en las muestras recolectadas en tubos sin gel separador en comparación con aquellas recolectadas en tubos con gel separador (Chang et al., 2003). En otros estudios se ha mostrado la presencia de interferencia cuando se utilizan tubos con gel separador en ensayos de diversas drogas terapéuticas. En un estudio realizado en el 2019 por Schrapp y colaboradores, se determinó que muchos análisis de fármacos se vieron afectados de forma significativa debido al uso de tubos con gel separador, entre ellos, antidepresivos, neurolépticos, fármacos cardiovasculares, ansiolíticos, hipnóticos, así como algunas drogas de abuso. Los investigadores proponen un papel importante de la estructura química de los fármacos que puede tanto afectar la estabilidad del analito como el equilibrio hidrofílico-lipofílico con el gel separador (Schrapp et al., 2019). 8 1.1.5. Comparación de métodos La comparación de métodos permite evaluar el sesgo cuando se mide el mismo analito, en este caso, un método de prueba se compara contra un método de referencia, de manera que se puede evaluar si los dos métodos generan resultados equivalentes dentro del poder estadístico del experimento. Generalmente se utiliza para determinar si el método de prueba es un reemplazo adecuado del método que se usaba tradicionalmente (CLSI, 2002). El diseño del estudio de comparación determina la calidad de los resultados y a su vez, la validez de las conclusiones. La clave principal de un estudio de comparación de métodos exitosa es planificar adecuadamente el ensayo, de manera que se logre responder si los dos métodos que se están estudiando pueden usarse indistintamente, es decir, que dicho cambio no afectará los resultados de los pacientes, así como las decisiones médicas basadas en dichos reportes (Simundic, 2016). Según lo establece el Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) en su guía EP9, para el experimento de comparación de métodos se recomienda el análisis de al menos 40 muestras de pacientes, por un período mínimo de 5 días. Cada muestra debe ser analizada por duplicado, usando ambos métodos, y al menos el 50% de las muestras que se procesan deben estar fuera del intervalo de referencia establecido en el laboratorio (CLSI, 2002). Es importante considerar que el primer paso del análisis de los datos obtenidos en un estudio de comparación es realizar los gráficos; esto permite detectar visualmente valores atípicos y si se ha cubierto el rango de medición del analito. El diagrama de dispersión y de diferencias son los más usados (Simundic, 2016). El diagrama de dispersión permite observar la variabilidad en las mediciones, en el rango analítico, donde cada par de mediciones representa un punto en el gráfico (Simundic, 9 2016). Para el análisis de los datos y las gráficas respectivas, el método en estudio se trabaja en el eje de las ordenadas “Y”, mientras que el método de referencia en el eje de las abscisas “X”. La evaluación puede realizarse de forma cuantitativa por medio de análisis de regresión lineal (CLSI, 2002; Westgard, 2013). El análisis de correlación proporciona la evidencia de la relación lineal existente. El coeficiente de correlación (r) y el coeficiente de determinación (r2) evalúan el grado de asociación que existe entre los métodos, es decir, estudian la relación entre las variables. (Giavarina, 2015; Simundic, 2016). Según la Guía EP9 de la CLSI un r ≥ 0,975 (r2 ≥ 0,95) es adecuado para los ensayos rutinarios del laboratorio, idealmente debe ser lo más cercana a 1, en caso de ser < 0,95 el rango de los datos debe ampliarse analizando muestras adicionales (CLSI, 2002). En la comparación de métodos por regresión lineal se determina la ecuación de la recta: y = mx + b, donde m es la pendiente y b es el intercepto. En una correlación perfecta m=1 y b=0. Además, el error estándar del estimado S y·x representa la desviación estándar de las diferencias, es decir, la variabilidad alrededor de línea de mejor ajuste, por lo que idealmente debe ser cercano a cero (Bilic-Zulle, 2011). Para evaluar la comparabilidad de ambos métodos se sugiere el uso de los diagramas de las diferencias (Giavarina, 2015; Simundic, 2016). Estos diagramas permiten evaluar la existencia de algún sesgo significativo entre las mediciones realizadas. En este tipo de gráficos, el eje “Y” corresponde a la diferencia entre los métodos (A-B), y en el eje “X” el promedio de los métodos (A+B/2); este gráfico también se conoce como Bland – Altman (Simundic, 2016). 10 En el diagrama de Bland – Altman aparecen 3 líneas paralelas; una de estas líneas representa la diferencia media, que representa el valor medio de A – valor medio de B y refleja error sistemático. Además, la línea superior e inferior representan los límites de concordancia, que representan a la diferencia media +/- 1,96 SD. Si los métodos A y B presentan resultados similares la diferencia media se ubicará en cero o cerca de este valor, si por el contrario se encuentra lejano a cero significa que los dos métodos producen resultados diferentes (Giaviarina, 2015). 1.1.6. Validación de tubos de extracción de muestras de sangre No es común que se realicen validaciones de los materiales que se utilizan para la extracción de las muestras sanguíneas, como son los tubos, sin embargo, el Working Group for Preanalytical Phase of European Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (EFLM WG-PRE) indica que idealmente debe realizarse una validación local, de manera que se puede determinar si los nuevos tubos para la extracción de sangre puedan ser una fuente de error en los análisis que se realizarán. La EFLM WG-PRE recomienda entre 20 y 100 muestras de sangre pareadas, usando tanto el tubo nuevo como el de control, preferiblemente en brazos opuestos (Lippi et al, 2016). Para la validación clínica de los tubos de extracción, la EFLM WG-PRE admite la medición pareada de todos aquellos parámetros de laboratorio en los que se usarán las muestras que se obtengan en dichos tubos. Para el análisis de los datos obtenidos recomienda comparar ambos por medio de regresión de Passing y Bablok y/o Deming, así como por medio de gráficos de Bland – Altman. Las especificaciones de calidad se establecen de acuerdo a los requerimientos deseables, pero para la evaluación final debe considerarse la 11 relevancia clínica de los resultados y la variación biológica para cada analito (Lippi et al, 2016). Cuando se analizan los datos y la regresión obtenida no es aceptable, y se obtiene un sesgo mayor que las especificaciones de calidad deseadas para cada analito, la EFLM WG- PRE sugiere que se mantengan en uso los tubos para extracción de sangre que se usaban anteriormente, o en caso que el laboratorio desee implementar el uso de los nuevos tubos se debe realizar un ajuste en los rangos de referencia para los análisis en los que se detecte una diferencia clínicamente significativa entre ambos tubos (Lippi et al, 2016). Por su parte, la CLSI, en la guía H1-A5, recomienda de igual forma, que aquellos tubos para extracción de muestras sanguíneas deben ser validados, y para ello sugiere que se use la metodología que indica la guía EP9 de comparación de métodos y estimación de sesgo usando muestras de pacientes (CLSI, 2003). 12 2. Justificación Realizar una adecuada recolección de las muestras es uno de los pasos críticos para generar resultados de calidad. Generalmente los dispositivos que se utilizan para la extracción de sangre no son considerados dentro de las variables preanalíticas que influyen en los resultados que se reportan. Sin embargo, se conoce que los diferentes aditivos o componentes de los tubos que se utilizan en la extracción, pueden alterar la estabilidad de los analitos y por lo tanto ser una fuente de error preanalítico en las diferentes determinaciones que se realizan en el laboratorio (Bowen y Remaley; 2014). A partir del año 2019 se adquirió, mediante licitación nacional, la compra de tubos con gel separador para la toma de muestras sanguíneas de los Laboratorios Clínicos de la Caja Costarricense de Seguro Social (CCSS). La Comisión Técnica de Normalización y Compras de Laboratorio Clínico realizó evaluaciones antes de su adquisición para verificar el cumplimiento de las especificaciones técnicas solicitadas. Sin embargo, estas evaluaciones no incluían la comparación analítica de resultados con respecto a los tubos que se han usado rutinariamente, los cuales no contienen gel separador (Comisión Técnica de Normalización y Compras, 2018). Es por esta razón que se propone el estudio de comparación de los resultados obtenidos al analizar 21 analitos bioquímicos, a partir de residuos de muestras recolectadas en tubos con gel separador y sin gel, para determinar si existe correlación entre los resultados obtenidos en ambos casos y se pueda demostrar idoneidad de los tubos con gel separador marca Hongyu Medical® en el uso rutinario para los análisis de Química Clínica. 13 3. Planteamiento del problema Los tubos con gel separador Hongyu Medical® deben ser evaluados utilizando como referencia el método tradicional mediante tubos sin gel separador antes de ser utilizados en la práctica rutinaria. 14 4. Objetivos 4.1. Objetivo General Comparar los tubos de extracción de sangre Hongyu Medical® con gel separador y Vacuette® sin gel separador por medio del análisis bioquímico de 21 analitos para verificar si existen diferencias en los resultados entre ambos sistemas. 4.2. Objetivos específicos • Seleccionar residuos de muestras recolectadas en tubos con gel separador marca Hongyu Medical® y Vacuette® sin gel para realizar el análisis bioquímico de 21 analitos. • Cuantificar los analitos en las muestras seleccionadas para obtener los resultados por ambos tipos de tubos. • Analizar por estadística de regresión lineal los resultados obtenidos en la determinación de los analitos para verificar si existen diferencias en los resultados entre ambos sistemas. • Visualizar por medio de gráficos de regresión de lineal y de Bland - Altman los resultados obtenidos para determinar la idoneidad de los tubos con gel en comparación con los tubos sin gel separador. 15 5. Metodología Se realizó una comparación entre dos tipos de tubos usados en extracción de sangre: el tubo con gel separador de la marca Hongyu Medical® y el tubo sin gel de la marca Vacuette®, ambos con activador de la coagulación. Para dicho estudio se utilizó como guía la metodología sugerida por la EFLM WG-PRE sobre la validación local de tubos de extracción de sangre en laboratorios clínicos y el protocolo EP9 de la CLSI, para lo relativo al estudio de comparación de métodos. 5.1. Analitos a evaluar y muestras Para el estudio se realizó la medición de 21 analitos de química clínica, a partir de residuos de muestras recolectadas concomitantemente en tubo con gel separador y sin gel, abarcando todo el rango clínicamente significativo y con distribución en el intervalo de medición analítica declarado por el fabricante para cada ensayo. Además, se seleccionaron residuos de muestras que no presentaran hemólisis, ictericia y lipemia (a excepción de aquellas con triglicéridos en altas concentraciones), para evitar interferencia por estos factores. Los residuos de muestras recolectados tanto en tubo con gel separador como sin gel fueron procesados de manera simultánea, el mismo día de su recolección evitando procesos de almacenaje en refrigeración. Siguiendo las indicaciones de la guía EP9 de la CLSI relativo a la metodología para comparación de métodos se seleccionaron 40 residuos de muestras para cada analito. Dichos análisis se llevaron a cabo entre los meses de agosto y octubre del 2020, en días diferentes para evitar el sesgo por variación propia de un solo día. 16 Ya que actualmente, en el Laboratorio Clínico, los tubos Hongyu Medical® con gel separador se utilizan para análisis bioquímicos, mientras que las muestras para serología, inmunología y hormonas, se siguen recolectando en tubos sin gel separador, se pudieron seleccionar remanentes de muestras de pacientes a los que por solicitud médica requerían la recolección de muestras en ambos tubos, tanto de consulta externa como de hospitalización. Los analitos que se estudiaron fueron: • Metabolitos: glucosa, nitrógeno ureico, creatinina, ácido úrico y bilirrubina total. • Lípidos: triglicéridos, colesterol total y HDL colesterol. • Enzimas: aspartato aminotransferasa (AST), alanina aminotransferasa (ALT), fosfatasa alcalina (ALP), gamma glutamil transferasa (GGT), lactato deshidrogenasa (LDH). • Electrolitos: sodio, cloruro, potasio, calcio, magnesio y fósforo inorgánico. • Proteínas: albúmina y proteínas totales. En la tabla 1 se muestra la metodología empleada en la determinación de cada analito, así como el intervalo de linealidad para cada ensayo, según lo reportado por el fabricante. Tabla 1 Características de la metodología empleada para la determinación de los 21 analitos en el analizador AU 680 de Beckman Coulter. Analito Metodología Intervalo de linealidad Glucosa Hexoquinasa 10-800 mg/dL Nitrógeno Ureico Ureasa 2-130 mg/dL Creatinina Jaffé modificado 0,2-25 mg/dL Triglicéridos Lipasa/GPO-PAP sin corrección 10-1000 mg/dL Colesterol total Colesterol Oxidasa 25-700 mg/dL 17 Analito Metodología Intervalo de linealidad HDL colesterol Aclaramiento directo 2,5-200 mg/dL Ácido úrico Uricasa peroxidasa 1,5-30,0 mg/dL Bilirrubina total Diclorofenil diazonio 0-30 mg/dL AST Tris buffer sin P5P 3-1000 U/L ALT Tris Buffer sin P5P 3-500 U/L ALP AMP optimizado IFCC 5-1500 U/L GGT GGT-3-carboxi-4-nitroanilida 3-1200 U/L LDH Lactato Deshidrogenasa 25-1200 U/L Proteínas totales Reacción de Biuret 3-12 g/dL Albúmina Verde de bromocresol 1,5-6,0 g/dL Sodio ISE indirecto 50-200 mmol/L Cloruro ISE indirecto 50-200 mmol/L Potasio ISE indirecto 1,0-10,0 mmol/L Calcio Arsenazo III 4,0-18,0 mg/dL Magnesio Xilidil azul 0,5-8,0 mg/dL Fósforo Fosfomolibdato 1,0-20,0 mg/dL Fuente: Insertos de reactivos Au, Beckman Coulter. 5.2. Analizador empleado Las determinaciones bioquímicas se realizaron en el analizador automatizado AU680 de Beckman Coulter instalado en la División de Química Clínica del Laboratorio Clínico, Hospital San Carlos. Antes de realizar los análisis se revisaron cuidadosamente los resultados de los blancos de reactivos y de las calibraciones, así como los controles internos de calidad, a manera de comprobación de que el equipo se encontrara funcionando adecuadamente. Además, dicho analizador cuenta con programas de aseguramiento externo de la calidad para las diferentes determinaciones, como es el Esquema Internacional de Aseguramiento de la Calidad Randox (RIQAS) y el Programa de Evaluación Externa del Desempeño en Química 18 Clínica (PEEDQC) del Instituto Costarricense de Investigación y Enseñanza en Nutrición y Salud (INCIENSA). 5.3. Recolección y análisis de datos Para la recolección de los resultados obtenidos se utilizó el instrumento que se muestra en el Anexo 1. Además, los datos fueron almacenados usando el programa informático Excel, donde también se realizaron los análisis estadísticos respectivos. Una vez obtenidos todos los datos de las mediciones, a partir de los residuos de muestras recolectadas en tubos con gel separador y sin gel, se realizó una comparación de los resultados para cada analito, por medio de un estudio de correlación por regresión lineal. Para el estudio de correlación se utilizó como referencia los resultados obtenidos a partir del residuo de muestra recolectada en los tubos sin gel, variable del eje “X”. Los datos del eje “Y” corresponden a aquellos que se obtuvieron a partir de los residuos de muestra recolectados en tubos con gel separador, que correspondía al método evaluado. Por medio de la herramienta estadística Excel, se realizó un estudio de regresión lineal simple, con su respectiva gráfica, así como el diagrama de las diferencias o Bland - Altman para cada uno de los 21 analitos. Una vez obtenida la estadística de regresión lineal, se determinó el error sistemático proporcional y constante para cada analito. La estimación del error sistemático proporcional de “Y” con respecto a “X” corresponde a la fórmula: (m-1) x 100, donde m es el valor de la pendiente obtenida en el análisis de regresión lineal. Este cálculo genera un resultado en porcentaje (%) que indica que las muestras al ser analizadas por el método en estudio en promedio generan resultados sistemáticamente más altos o más bajos, según el signo obtenido (positivo o negativo). 19 Por su parte, la estimación del error sistemático constante de “Y” con respecto a “X” corresponde al valor de b (intercepto) obtenido en la regresión lineal, con signo positivo o negativo y con las unidades de concentración correspondientes según cada analito en específico. Su interpretación corresponde a que al ser analizadas las muestras por el método en estudio en promedio generan resultados con una concentración mayor o menor. Se establecieron como metas analíticas los requerimientos de calidad definidos por CLIA, a excepción de fósforo y GGT, para los cuales CLIA no presenta metas establecidas; para estos dos analitos se planteó como error total aceptable los criterios de Royal College of Pathologists of Australasia (RCPA), estos se detallan en el cuadro 2. Con el fin de determinar si los resultados obtenidos en la comparación de los tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette® son equiparables, para cada analito se establecieron valores de decisión médica o de referencia de acuerdo a lo usado en el Laboratorio Clínico, y se determinó si para esos valores, el tubo con gel separador cumple con los requerimientos de calidad definidos, brindando un 25% del error total como lo máximo permitido para cada analito. En el caso del error sistemático constante obtenido para cada analito, dado que se obtiene en unidades de concentración, fue necesario convertir a porcentaje, y se estimó para cada valor de decisión médica o de referencia establecida según el analito. 20 Tabla 2 Error total aceptado según requerimientos de calidad de CLIA y RCPA utilizado según el analito. Analito CLIA RCPA Glucosa ± 6 mg/dL o ± 10% (lo mayor) - Nitrógeno ureico ± 2 mg/dL o ± 9% (lo mayor) - Creatinina ± 0,3 mg/dL o ± 15% (lo mayor) - Triglicéridos ± 25% - Colesterol Total ± 10% - HDL colesterol ± 30% - Ácido úrico ± 17% - Sodio ± 4 mmol/L - Cloruro ± 5% - Potasio ± 0,5 mmol/L - Calcio ± 1,0 mg/dL - Magnesio ± 25% - Fósforo - ± 8% Bilirrubina Total ± 0,4 mg/dL o ± 20% (lo mayor) - AST ± 20% - ALT ± 20% - ALP ± 30% - GGT - ± 12% LDH ± 20% - Proteínas totales ± 10% - Albúmina ± 10% - Fuente: Westgard, J. (2019). Quality Requirements. 21 6. Resultados y discusión A continuación, se presentan los resultados obtenidos al comparar los tubos con gel separador Hongyu Medical® y Vacuette® sin gel separador, al realizar la determinación bioquímica de 21 analitos. El análisis de los datos se realizó en la herramienta estadística Excel. Para cada analito evaluado se incluye el gráfico de diferencias (Bland - Altman) y el de regresión lineal. Los resultados obtenidos para cada analito se detallan en los Anexos. Además, en el cuadro 3, se resumen los datos obtenidos en el análisis de regresión lineal para la comparación de ambos tubos, en los 21 analitos estudiados. 6.1. Metabolitos 6.1.1. Glucosa Figura 2 Gráfico de regresión lineal para Glucosa al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal Glucosa 600 500 y = 0,9976x + 2,3232 R² = 0,9995 400 300 200 100 0 0 100 200 300 400 500 600 Tubos sin gel separador Vacuette® (mg/dL) Tubos con gel separador Hongyu Medical® (mg/dL) 22 Figura 3 Gráfico de Bland – Altman para Glucosa al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Glucosa 8 7,0 6 4 2 1,9 0 -2 0 200 400 600 800 -3,2 -4 -6 Medias Como se observa en la Figura 2, para el análisis de glucosa se obtuvo una excelente correlación, con un coeficiente cercano a 1. Además, se determina que, al analizarse las muestras recolectadas en tubos con gel separador, en promedio dan resultados 2 mg/dL más altos que cuando se utilizan tubos sin gel separador, de acuerdo a la estimación del error sistemático constante. El intercepto obtenido para el análisis de glucosa fue de 2,32 con un intervalo de confianza de 0,77 a 3,88 como se detalla en el Anexo 3. Debido a que el cero no se incluye dentro de dicho intervalo se considera que la diferencia entre ambos tubos si es significativa. Con respecto al diagrama de las diferencias (Figura 3) se observa dispersión de los datos a ambos lados de la línea media. En este gráfico, los datos en su mayoría se encuentran dentro de ambas líneas de concordancia y se confirma una diferencia media de 2 mg/dL entre ambos tubos. La disminución de la concentración de la glucosa asociado a los tubos de extracción de sangre es un gran inconveniente, pero muchas veces subestimado. Esto puede ser Tubos con gel - Tubo sin gel 23 problemático principalmente en aquellos pacientes en los que la concentración de glucosa se encuentra cerca de los valores de decisión médica, de ahí la importancia tanto de realizar una centrifugación rápida, como de mantener el suero separado del paquete de glóbulos rojos para mantener la estabilidad del analito (Sacks et al, 2011). Cabe mencionar que este hallazgo en los resultados no necesariamente va a representar un error analítico, ya que tradicionalmente se han considerado los valores de referencia con respecto a los tubos sin gel separador. Sin embargo, al requerir un período más largo de retracción del coágulo, se puede asociar a que en este tiempo se genera consumo de glucosa por metabolismo celular, por lo tanto, es un error inherente a este sistema. Al utilizar tubos con gel, una vez recolectada la muestra la separación se realiza en un tiempo menor, lo que explica que con este sistema los resultados sean ligeramente más altos. 6.1.2. Nitrógeno Ureico Figura 4 Gráfico de regresión lineal para Nitrógeno Ureico al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión Lineal Nitrógeno Ureico 200 y = 1,0065x - 0,0703 150 R² = 0,9992 100 50 00 00 50 100 150 200 Tubos sin gel separador Vacuette® (mg/dL) Tubos con gel separador Hongyu Medical® (mg/dL) 24 Figura 5 Gráfico de Bland – Altman para Nitrógeno Ureico al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Nitrógeno Ureico 4 3 2,9 2 1 0 0,2 -1 0 50 100 150 200 250 -2 -2,5 -3 -4 -5 Medias Con respecto al análisis de nitrógeno ureico se obtiene una alta concordancia entre los métodos. En el gráfico de Bland – Altman se observa una dispersión similar a ambos lados de la línea de diferencias medias, y esta dispersión no presenta un patrón diferente a valores altos y bajos. Algunos puntos se salen de las líneas de concordancia, sin embargo, al ser concentraciones altas del analito, se puede permitir un error más amplio en el método. Tubos con gel - tubos sin gel 25 6.1.3. Creatinina Figura 6 Gráfico de regresión lineal para Creatinina al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión Lineal Creatinina 12 10 y = 1,0062x - 0,0054 8 R² = 0,9995 6 4 2 0 0 2 4 6 8 10 12 Tubos sin gel separador Vacuette® (mg/dL) Figura 7 Gráfico de Bland – Altman para Creatinina al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Creatinina 0,3 0,2 0,1 0,1 0,0 0,01 0 5 10 15 -0,1 -0,1 -0,2 -0,3 Medias Tubos con gel - Tubos sin gel Tubos con gel separador Hongyu Medical® (mg/dL) 26 La creatinina, como se detalla en las figuras 6 y 7, presenta una alta concordancia en los resultados obtenidos en el tubo con gel separador y sin gel, con coeficiente de correlación cercano a 1. En el diagrama de Bland - Altman se observa que la línea de diferencias medias es bastante cercana a cero y los valores se distribuyen alrededor de esta, con la mayoría de resultados dentro de las líneas de concordancia y sin una tendencia específica a diferentes concentraciones del analito. 6.1.4. Ácido Úrico Figura 8 Gráfico de regresión lineal para Ácido úrico al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión Lineal Ácido úrico 20 y = 1,0097x - 0,1072 15 R² = 0,9982 10 05 00 00 05 10 15 20 Tubos sin gel separador Vacuette® (mg/dL) Tubos con gel separador Hongyu Medical® (mg/dL) 27 Figura 9 Gráfico de Bland – Altman para Ácido Úrico al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Ácido úrico 0,40 0,30 0,20 0,2 0,10 0,00 -0,10 0 5 10 15 20 -0,05 25 -0,20 -0,30 -0,3 -0,40 -0,50 -0,60 Medias Al realizar el ensayo de comparación entre los tubos con gel y sin gel, se pudo establecer que hay una excelente correlación entre los resultados obtenidos de ácido úrico, con r cercano a 1. Por otra parte, en la figura 9, correspondiente al diagrama de Bland – Altman puede observarse que los puntos se distribuyen de forma uniforme alrededor de la línea de diferencias medias, por lo que puede decirse que las muestras recolectadas en ambos tubos generan resultados bastante similares para este analito. Tubos con gel - Tubos sin gel 28 6.1.5. Bilirrubina total Figura 10 Gráfico de regresión lineal para Bilirrubina Total al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión Lineal Bilirrubina Total 6,0 5,0 y = 0,9984x + 0,0102 4,0 R² = 0,9987 3,0 2,0 1,0 0,0 0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 Tubos sin gel separador Vacuette® (mg/dL) Figura 11 Gráfico de Bland – Altman para Bilirrubina Total al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Bilirrubina Total 0,25 0,20 0,15 0,10 0,11 0,05 0,00 0,01 -0,05 0 2 4 6 8 -0,10 -0,10 -0,15 Medias Tubos con gel - Tubos sin gel Tubos con gel separador Hongyu Medical® (mg/dL) 29 De acuerdo a la Figura 10, correspondiente al gráfico de regresión lineal para Bilirrubina Total, se determina que, al estudiar este analito tanto en tubos con gel separador como sin gel, los resultados presentan una buena correlación. En la Figura 11, se confirma esta alta concordancia entre ambos tubos de recolección de sangre, donde la mayoría de los datos se encuentran sobre la línea de diferencias medias y esta a su vez se ubica cercana a cero, es decir, los resultados obtenidos con ambos tubos difieren en muy poco. 6.2. Lípidos 6.2.1. Triglicéridos Figura 12 Gráfico de regresión lineal para Triglicéridos al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal Triglicéridos 1400 1200 1000 y = 0,9996x + 0,369R² = 0,9998 800 600 400 200 0 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 Tubos sin gel separador Vacuette® (mg/dL) Tubos con gel separador Hongyu Medical® (mg/dL) 30 Figura 13 Gráfico de Bland – Altman para Triglicéridos al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Triglicéridos 10 8 7,8 6 4 2 0 0,2 -2 0 500 1000 1500 -4 -6 -8 -7,4 -10 Medias 6.2.2. Colesterol Figura 14 Gráfico de regresión lineal para Colesterol al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal Colesterol 600 500 y = 0,9982x + 0,6512 R² = 0,9996 400 300 200 100 0 0 100 200 300 400 500 600 Tubos sin gel separador Vacuette® (mg/dL) Tubos con gel separador Hongyu ® Tubos con gel - Tubos sin gelMedical (mg/dL) 31 Figura 15 Gráfico de Bland – Altman para Colesterol al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Colesterol 6 4,8 4 2 0 0,3 -2 0 200 400 600 800 -4 -4,2 -6 -8 Medias 6.2.3. HDL colesterol Figura 16 Gráfico de regresión lineal para HDL colesterol al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal HDL colesterol 120 100 y = 1,0013x + 0,1466 R² = 0,9988 80 60 40 20 0 0 20 40 60 80 100 120 Tubos sin gel separador Vacuette® (mg/dL) Tubos con gel separador Hongyu Medical® (mg/dL) Tubos con gel - Tubos sin gel 32 Figura 17 Gráfico de Bland – Altman para HDL colesterol al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman HDL colesterol 2,5 2 2,0 1,5 1 0,5 0 0,2 -0,5 0 50 100 150 -1 -1,5 -1,6 -2 -2,5 Medias En el caso de los analitos del perfil lipídico (triglicéridos, colesterol total y HDL colesterol), el estudio de regresión lineal para cada uno de ellos mostró una excelente correlación entre los tubos sin gel y los tubos con gel separador. El gráfico de las diferencias mostró una dispersión de los datos alrededor de la línea media, dentro de los puntos de concordancia y sin una tendencia específica a diferentes concentraciones. Los gráficos para estos analitos corresponden a la Figura 12 a 17. Tubos con gel - Tubos sin gel 33 6.3. Electrolitos 6.3.1. Sodio Figura 18 Gráfico de regresión lineal para Sodio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Comparación Sodio 160,0 150,0 y = 1,0015x - 0,2887 140,0 R² = 0,9912 130,0 120,0 110,0 100,0 100,0 110,0 120,0 130,0 140,0 150,0 160,0 Tubos sin gel separador Vacuette® Figura 19 Gráfico de Bland – Altman para Sodio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Sodio 2,5 2,0 1,5 1,0 1,1 0,5 0,0 -0,1 -0,5 0 50 100 150 200 250 -1,0 -1,5 -1,3 Medias Tubos con gel - Tubos sin gel Tubos con gel separador Hongyu Medical® 34 6.3.2. Cloruro Figura 20 Gráfico de regresión lineal para Cloruro al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal Cloruro 130,0 120,0 y = 0,9961x + 0,1281 110,0 R² = 0,9943 100,0 90,0 80,0 70,0 60,0 60,0 70,0 80,0 90,0 100,0 110,0 120,0 130,0 Tubos sin gel separador Vacuette® (mmol/L) Figura 21 Gráfico de Bland – Altman para Cloruro al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Cloruro 1,0 0,8 0,5 0,0 -0,5 0 50 100 -0,3 150 -1,0 -1,5 -1,3 -2,0 -2,5 Medias Tubos con gel - Tubos sin gel Tubos con gel separador Hongyu Medical® (mmol/L) 35 6.3.3. Potasio Figura 22 Gráfico de regresión lineal para Potasio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal Potasio 6,00 y = 1,0132x - 0,0531 5,00 R² = 0,9814 4,00 3,00 2,00 2,00 3,00 4,00 5,00 6,00 Tubos sin gel separador Vacuette® (mmol/L) Figura 23 Gráfico de Bland – Altman para Potasio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland-Altman Potasio 0,4 0,3 0,2 0,2 0,1 0,0 0,0 -0,1 0 2 4 6 8 -0,2 -0,2 -0,3 Medias Tubos con gel separador Hongyu Tubos con gel - tubos sin gel Medical® (mmol/L) 36 Con respecto a los electrolitos sodio, potasio y cloruro, pudo observarse que los 3 analitos presentaron excelentes coeficientes de correlación. Además, se obtuvieron pendientes cercanas a 1 e interceptos cercanos a cero, como se espera de una buena correlación entre los dos sistemas, como se demuestra en las figuras 18, 20 y 22. En los diagramas de Bland – Altman correspondientes a dichos electrolitos (Figuras 19, 21 y 23) se observa que la línea media de las diferencias es cercana a cero, con los datos dispersos por igual a ambos lados de esta línea. Además, en los 3 casos, la mayoría de puntos se encuentran ubicados en el intervalo comprendido por las líneas de concordancia, reflejando una buena correlación en los tubos con gel separador y sin gel, al analizar sodio, potasio y cloruro. 6.3.4. Calcio Figura 24 Gráfico de regresión lineal para Calcio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal Calcio 11,00 10,00 y = 1,0085x - 0,0184 9,00 R² = 0,9928 8,00 7,00 6,00 5,00 5,00 6,00 7,00 8,00 9,00 10,00 11,00 Tubos sin gel separador Vacuette® (mg/dL) Tubos con gel separador Hongyu Medical® (mg/dL) 37 Figura 25 Gráfico de Bland – Altman para Calcio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Calcio 0,30 0,20 0,22 0,10 0,05 0,00 0 5 10 15 -0,10 -0,12 -0,20 Medias El calcio es otro de los electrolitos donde el estudio de correlación muestra que los tubos con gel separador y sin gel generan resultados bastante similares. Esto se determina también en el gráfico de las diferencias obtenido, donde los valores se distribuyen de forma similar a ambos lados de la línea media de las diferencias, y además todos los valores se encuentran dentro de las líneas de concordancia, y no parece existir tendencias asociadas a diferentes concentraciones del analito. En el caso del gráfico de Bland – Altman para calcio, se obtiene una dispersión característica de los datos, que se asocia a que el sistema de información del Laboratorio Clínico, realiza un redondeo de los resultados obtenidos a partir del analizador, de manera que, aunque el analito se reporta con 3 cifras significativas, se redondea de manera que siempre se generan resultados con el último decimal terminando en cero, de ahí que se genere este tipo de distribución de los datos. Tubos con gel - Tubos sin gel 38 6.3.5. Magnesio Figura 26 Gráfico de regresión lineal para Magnesio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal Magnesio 4,00 3,50 y = 1,0264x - 0,0558 3,00 R² = 0,9912 2,50 2,00 1,50 1,00 1,00 1,50 2,00 2,50 3,00 3,50 4,00 Tubos sin gel separador Vacuette® (mg/dL) Figura 27 Gráfico de Bland – Altman para Magnesio al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Magnesio 0,20 0,15 0,10 0,08 0,05 0,00 0,00 0,00 1,00 2,00 3,00 4,00 -0,05 -0,10 -0,08 Medias Tubos con gel - Tubos sin gel Tubos con gel separador Hongyu Medical® (mg/dL) 39 El magnesio presenta una buena correlación al ser analizado en ambos tubos. En promedio se obtienen resultados 2,6% más altos en tubos con gel separador que sin gel como se observa en la figura 26. Por su parte, en el diagrama de las diferencias se observa distribución de los resultados entre las líneas de concordancia y a ambos lados de la línea media de las diferencias de forma similar, sin una tendencia en específico. Además, cabe recalcar, que la línea media de las diferencias queda en cero, lo cual también es indicativo de la importante asociación de los datos obtenidos por los dos sistemas. 6.3.6. Fósforo Figura 28 Gráfico de regresión lineal para Fósforo al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal Fósforo 10,00 y = 0,9989x + 0,0247 8,00 R² = 0,9973 6,00 4,00 2,00 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00 Tubos sin gel separador Vacuette® (mg/dL) Tubos con gel separador Hongyu Medical® (mg/dL) 40 Figura 29 Gráfico de Bland – Altman para Fósforo al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Fósforo 0,40 0,30 0,20 0,19 0,10 0,00 0,02 -0,10 0 2 4 6 8 10 12 -0,15 -0,20 -0,30 Medias El fósforo, otro de los electrolitos estudiados, presenta también muy buena correlación al ser analizado en tubos con gel separador y sin gel, de acuerdo al estudio de regresión lineal. En el gráfico de Bland – Altman, se confirma esta buena asociación de los resultados, ya que la distribución es semejante a ambos lados de la línea media de las diferencias, la cual está bastante cerca de cero, y no se observan diferencias asociadas a concentraciones específicas del analito. Tubos con gel - Tubos sin gel 41 6.4. Enzimas 6.4.1. AST Figura 30 Gráfico de regresión lineal para AST al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal AST 800 600 y = 1,0058x - 1,5007 R² = 0,9998 400 200 0 0 200 400 600 800 Tubos sin gel separador Vacuette® (U/L) Figura 31 Gráfico de Bland – Altman para AST al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman AST 6 4 3,9 2 0 -0,7 -2 0 200 400 600 800 -4 -6 -5,3 -8 -10 Medias Tubos con gel - Tubos sin gel Tubos con gel separador Hongyu Medical® (U/L) 42 La enzima AST presenta resultados bastante concordantes entre el sistema de recolección de sangre con gel separador y sin gel, con un coeficiente de correlación cerca de 1. En promedio se obtuvieron resultados 1,5 U/L más bajas en el tubo con gel separador (Figura 30). Además, la dispersión de los datos es homogénea alrededor de la línea media de las diferencias y la mayoría de datos se encuentran dentro del intervalo de las líneas de concordancia como se observa en la figura 31. 6.4.2. ALT Figura 32 Gráfico de regresión lineal para ALT al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal ALT 600 500 y = 0,9981x + 0,5002 400 R² = 0,9997 300 200 100 0 0 100 200 300 400 500 600 Tubos sin gel separador Vacuette® (U/L) Tubos con gel separador Hongyu Medical® (U/L) 43 Figura 33 Gráfico de Bland – Altman para ALT al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman ALT 10 8 6 4 4,8 2 0 0,3 -2 0 200 400 600 800 -4 -4,3 -6 Medias 6.4.3. ALP Figura 34 Gráfico de regresión lineal para ALP al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal ALP 1000 800 600 y = 1,0007x - 0,3929R² = 0,9995 400 200 0 0 200 400 600 800 1000 Tubos sin gel separador Vacuette® (U/L) Tubos con gel separador Hongyu Tubos con gel - Tubos sin gel Medical® (U/L) 44 Figura 35 Gráfico de Bland – Altman para ALP al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman ALP 10 8,2 5 0 -0,3 0 200 400 600 800 1000 1200 -5 -8,7 -10 Medias 6.4.4. GGT Figura 36 Gráfico de regresión lineal para GGT al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal GGT 800 600 y = 0,9926x + 0,2783 R² = 0,9999 400 200 0 0 200 400 600 800 Tubos sin gel separador Vacuette® (U/L) Tubos con gel separador Hongyu Tubos con gel - Tubos sin gel Medical® (U/L) 45 Figura 37 Gráfico de Bland – Altman para GGT al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman GGT 6 4 3,9 2 0 0 200 400 600 800 -1,0-2 1000 -4 -6 -5,8 -8 -10 Medias Para ALT, ALP y GGT el estudio de regresión lineal mostró una alta correlación entre los resultados obtenidos en los tubos con gel separador y sin gel separador. En los tres analitos, las gráficas de Bland – Altman muestran que la línea media de las diferencias se encuentran cercanas a cero, y los datos se encuentran dispersos dentro de las líneas de concordancia en su mayoría, con distribución semejante a ambos lados de la línea media. En el caso particular de la GGT, con respecto al gráfico de Bland – Altman se observa una tendencia de resultados con valores disminuidos en los tubos con gel separador con respecto a los tubos sin gel a concentraciones de analito mayores a 400 mg/dL. Tubos con gel - Tubos sin gel 46 6.4.5. LDH Figura 38 Gráfico de regresión lineal para LDH al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal LDH 1200 1000 y = 0,9984x - 2,7993 R² = 0,9983 800 600 400 200 0 0 200 400 600 800 1000 1200 Tubos sin gel separador Vacuette® (U/L) Figura 39 Gráfico de Bland – Altman para LDH al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman LDH 30 20 16,4 10 0 0 -3,3 500 1000 -3,3 1500 -10 -20 -23,0 -30 Medias En el caso de la LDH, el estudio de regresión lineal mostró un coeficiente de correlación cercano a 1 entre ambos sistemas de tubos de extracción de sangre, y se Tubos con gel - tubos sin gel Tubos con gel separador Hongyu Medical® (U/L) 47 determinó que los resultados obtenidos de las muestras provenientes de tubos con gel separador en promedio dan 3 U/L más bajas que en los tubos sin gel, esto se puede observar en la Figura 38. Por su parte, la distribución de los datos es homogénea en el gráfico de Bland - Altman, la línea media de las diferencias se encuentra cerca de cero y la mayoría de los datos se encuentran dentro del intervalo de las líneas de concordancia (Figura 39), todo esto muestra alta similitud en los resultados entre ambos sistemas de extracción de sangre. 6.5. Proteínas 6.5.1. Proteínas totales Figura 40 Gráfico de regresión lineal para Proteínas Totales al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal Proteínas Totales 10,00 y = 0,9874x + 0,1373 8,00 R² = 0,9962 6,00 4,00 2,00 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00 Tubos sin gel separador Vacuette® (g/dL) Tubos con gel separador Hongyu Medical® (g/dL) 48 Figura 41 Gráfico de Bland – Altman para Proteínas Totales al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Proteínas Totales 0,40 0,30 0,24 0,20 0,10 0,06 0,00 0 2 4 6 8 10 12 -0,10 -0,12 -0,20 Medias 6.5.2. Albúmina Figura 42 Gráfico de regresión lineal para Albúmina al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Regresión lineal Albúmina 6,00 5,00 y = 0,998x + 0,0139 R² = 0,9985 4,00 3,00 2,00 1,00 0,00 0,00 1,00 2,00 3,00 4,00 5,00 6,00 Tubos sin gel separador Vacuette® (g/dL) Tubos con gel separador Hongyu Tubos con gel - Tubos sin gel Medical® (g/dL) 49 Figura 43 Gráfico de Bland – Altman para Albúmina al usar tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Bland - Altman Albúmina 0,20 0,15 0,10 0,09 0,05 0,00 0,01 0 2 4 6 8 -0,05 -0,08 -0,10 Medias Las proteínas totales y la albúmina, mostraron coeficientes de correlación cercanos a 1 y la dispersión de los datos es homogénea alrededor de la línea media de las diferencias, no se mostró tendencia alguna a concentraciones específicas de analito y los puntos en su mayoría están dentro las líneas de concordancia, por lo tanto, se determina que existe una buena correlación entre los resultados en ambos tubos (Figuras 40 a la 43). Tubos con gel - Tubos sin gel 50 Tabla 3 Resumen de análisis de regresión lineal y error sistemático proporcional y constante para 21 analitos, al comparar los tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Error Error Analito Ecuación de la recta r2 sistemático sistemático proporcional constante Glucosa y = 0,9976x+2,3232 0,9995 -0,24 % +2,32 mg/dL Nitrógeno ureico y = 1,0065x - 0,0703 0,9992 +0,65 % -0,07 mg/dL Creatinina y = 1,0062x - 0,0054 0,9995 +0,62 % -0,005 mg/dL Triglicéridos y = 0,9996x + 0,3690 0,9980 -0,04 % +0,37 mg/dL Colesterol y = 0,9982x + 0,6512 0,9960 -0,18 % +0,65 mg/dL HDL colesterol y = 1,0013x + 0,1466 0,9988 +0,13 % +0,15 mg/dL Ácido úrico y = 1,0097x - 0,1072 0,9982 +0,97 % -0,11 mg/dL Sodio y = 1,0015x - 0,2887 0,9912 +0,15 % -0,29 mmol/L Cloruro y = 0,9961x + 0,1281 0,9943 -0,39 % +0,13 mmol/L Potasio y = 1,0132x - 0,0531 0,9814 +1,32 % -0,05 mmol/L Calcio y = 1,0085x - 0,0184 0,9928 +0,85 % -0,02 mg/dL Magnesio y = 1,0264x - 0,0558 0,9912 +2,64 % -0,06 mg/dL Fósforo y = 0,9989x + 0,0247 0,9973 -0,11 % +0,02 mg/dL Bilirrubina Total y = 0,9984x + 0,0102 0,9987 -0,16 % +0,01 mg/dL AST y = 1,0058x - 1,5007 0,9980 +0,58 % -1,50 U/L ALT y = 0,9981x + 0,5002 0,9970 -0,19 % +0,50 U/L ALP y = 1,0007x - 0,3929 0,9950 +0,07 % -0,39 U/L GGT y = 0,9926x + 0,2783 0,9999 -0,74 % +0,28 U/L LDH y = 0,9984x - 2,7993 0,9983 -0,16 % -2,80 U/L Proteínas totales y = 0,9874x + 0,1373 0,9962 -1,26 % +0,14 g/dL Albúmina y = 0,9980x + 0,0139 0.9985 -0,20 % +0,01 g/dL 51 Dado que el error sistemático constante se obtiene en las unidades de medida de cada analito, se realiza una conversión a porcentaje de acuerdo a los valores de decisión médica propuestos. El error permitido que se estableció para determinar idoneidad de los tubos con gel separador Hongyu Medical®, con respecto a los tubos sin gel Vacuette®, corresponde al 25% del error total según los requerimientos de CLIA o RCPA. Tabla 4 Porcentaje de error obtenido en la comparación de los tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®. Error Error Error ¿Se Valor de decisión sistemático sistemático Analito permitido acepta médica proporcional constante ± (%) * ? (%) (%) 100 mg/dL 2,32 2,50 Sí Glucosa 126 mg/dL -0,24 1,84 2,50 Sí 200 mg/dL 1,16 2,50 Sí Nitrógeno 25,0 mg/dL 0,65 -0,28 2,25 Sí ureico Creatinina 1,2 mg/dL 0,62 -0,45 6,25 Sí Triglicéridos 150 mg/dL -0,04 0,25 6,25 Sí Colesterol 200 mg/dL -0,18 0,32 2,50 Sí HDL 30 mg/dL 0,13 0,49 7,50 Sí colesterol Ácido úrico 7,0 mg/dL 0,97 -1,53 4,25 Sí B: 135,0 mmol/L -0,21 0,74 Sí Sodio 0,15 A: 145,0 mmol/L -0,20 0,69 Sí B: 98,0 mmol/L 0,13 1,25 Sí Cloruro -0,39 A: 107,0 mmol/L 0,12 1,25 Sí 52 Error Error Error ¿Se Valor de decisión sistemático sistemático Analito permitido acepta médica proporcional constante ± (%) * ? (%) (%) B: 3,50 mmol/L -1,52 3,57 Sí Potasio 1,32 A: 5,50 mmol/L -0,96 2,27 Sí B: 8,50 mg/dL -0,22 2,94 Sí Calcio 0,85 A: 10,50 mg/dL -0,18 2,38 Sí B: 1,90 mg/dL -2,94 6,25 Sí Magnesio 2,64 A: 2,50 mg/dL -2,32 6,25 Sí B: 2,50 mg/dL 0,99 2,00 Sí Fósforo -0,11 A: 5,50 mg/dL 0,45 2,00 Sí Bilirrubina 1,0 mg/dL -0,16 1,02 10,00 Sí Total AST 42 U/L 0,58 -3,57 5,00 Sí ALT 50 U/L -0,19 1,00 5,00 Sí ALP 126 U/L 0,07 -0,31 7,50 Sí GGT 64 U/L -0,74 0,43 3,00 Sí LDH 193 U/L -0,16 -1,45 5,00 Sí Proteínas 6,0 g/dL -1,26 2,29 2,50 Sí totales Albúmina 3,5 g/dL -0,20 0,40 2,50 Sí B: Valor de referencia bajo, A: Valor de referencia alto. *Error permitido: corresponde al 25% del error total establecido según el analito (CLIA o RCPA) De acuerdo a los resultados obtenidos en la comparación de los tubos con gel separador Hongyu Medical® y los tubos sin gel Vacuette®, se determinó que todos los analitos, en los valores establecidos en el estudio, tanto los de decisión médica como los valores altos y/o bajos de referencia, cumplen con las metas de calidad propuestas como se puede detallar en la tabla 4. 53 Los tubos con gel separador Hongyu Medical® por lo tanto presentan idoneidad para su uso en la recolección de muestras de sangre, para el análisis rutinario de los análisis bioquímicos del Laboratorio Clínico y pueden usarse en sustitución de los tubos sin gel Vacuette® que tradicionalmente se utilizaban para este fin. Para este estudio se contempló como requerimientos de calidad CLIA, ya que involucra directamente la parte preanalítica de los análisis bioquímicos, por lo tanto, se permitió un error un poco más amplio. En este aspecto es importante considerar, además, que un posible error de los tubos de recolección de muestra nunca se va a reflejar en los controles de calidad usados en el laboratorio (internos y externos), por lo tanto, es un error que afectaría directamente a los resultados que se reportan de los pacientes, sin que en los controles reflejen el problema analítico. Además, por el alcance de la investigación, como validación de los tubos con gel separador Hongyu Medical®, se recomienda que ante posibles inconvenientes o cuando se desee verificar su correcto funcionamiento, puede realizarse un ensayo similar con una menor cantidad de muestras cubriendo valores bajos, normales y altos de la concentración del analito deseado. En caso que se requiera un nuevo cambio a otro tipo de tubo para extracción de muestras sanguíneas, debe realizarse el estudio de validación respectivo, considerando todos los analitos que se van a determinar en las muestras y cualquier otra variante que pueda afectar los resultados reportados a los pacientes. 54 Conclusiones Por medio del estudio de regresión lineal se pudo determinar que los tubos con gel separador Hongyu Medical® y Vacuette® sin gel separador presentan buena correlación en el análisis bioquímico de los analitos de uso tradicional en el Laboratorio Clínico. Al comparar los resultados obtenidos en los tubos con gel separador Hongyu Medical® y sin gel Vacuette®, por medio de gráficos de regresión lineal y de Bland – Altman se pudo determinar que los 21 analitos bioquímicos presentan resultados similares por ambos sistemas y sin tendencias específicas a diferentes concentraciones de los analitos. Al establecer metas de calidad y comparar con el error obtenido para cada analito, se pudo determinar que los 21 analitos cumplen con los requerimientos de calidad establecidos y por la tanto se comprueba la idoneidad de los tubos con gel separador para su uso rutinario en el Laboratorio Clínico. 55 Referencias Babakhani, B., Movahed, S. O., Ghazy, S., & Ahmadpour, A. (2018). A new formulation for polymeric separator gels for potential use in blood serum separator tubes. Progress in Rubber Plastics and Recycling Technology; 34(1), 35-53. Bilic-Zulle, L. (2011). Comparison of methods: Passing and Bablok regression. Biochemia Medica; 21(1):49-52. DOI: 10.11613/bm.2011.010 Bowen, R., Hortin, G., Csako, G., Otañez, O., Remaley, A. (2010). Impact of blood collection devices on clinical chemistry assays. Clinical Biochemistry 43: 4-25 https://doi.org/10.1016/j.clinbiochem.2009.10.001 Bowen, R., Remaley, A. (2014). 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Analito: Analito: Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 01 01 02 02 03 03 04 04 05 05 06 06 07 07 08 08 09 09 10 10 11 11 12 12 13 13 14 14 15 15 16 16 17 17 18 18 19 19 20 20 21 21 22 22 23 23 24 24 25 25 26 26 27 27 28 28 29 29 30 30 31 31 32 32 33 33 60 Analito: Analito: Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 34 34 35 35 36 36 37 37 38 38 39 39 40 40 61 Anexo 2. Resultados obtenidos en 21 analitos al realizar el experimento de comparación de tubos con gel separador y sin gel. Analito: Glucosa Analito: Nitrógeno Ureico Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 01 83 82 01 2,6 2,9 02 77 75 02 60,9 61,0 03 123 120 03 51,4 52,3 04 213 211 04 10,1 10,1 05 293 295 05 11,5 11,6 06 146 147 06 25,3 25,2 07 98 96 07 20,9 20,6 08 137 136 08 11,6 11,5 09 158 159 09 170,6 174,4 10 261 261 10 18,7 18,9 11 87 86 11 9,4 9,3 12 166 162 12 9,8 9,9 13 70 69 13 21,3 20,9 14 156 153 14 16,3 16,3 15 103 100 15 6,6 6,6 16 294 290 16 24,4 23,9 17 427 421 17 55,0 51,7 18 127 123 18 25,9 25,9 19 122 120 19 49,3 50,1 20 93 96 20 29,0 28,9 21 87 82 21 34,9 35,4 22 112 109 22 16,5 16,6 23 325 330 23 21,0 21,4 24 119 120 24 161,7 158,4 25 122 119 25 43,4 42,9 26 109 106 26 14,9 14,9 27 258 254 27 80,6 81,6 28 99 100 28 36,8 37,2 29 68 63 29 24,0 24,2 30 93 89 30 54,6 51,9 31 110 108 31 65,9 66,7 32 125 124 32 12,4 12,5 33 252 246 33 73,2 75,0 34 249 244 34 147,2 143,6 35 34 33 35 8,2 7,9 62 Analito: Glucosa Analito: Nitrógeno Ureico Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 36 98 94 36 18,7 18,3 37 321 317 37 168,6 165,4 38 363 360 38 33,7 32,8 39 479 483 39 37,8 37,4 40 452 450 40 132,6 132,3 Analito: Creatinina Analito: Triglicéridos Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 01 0,42 0,43 01 100 101 02 4,95 4,96 02 181 180 03 0,84 0,84 03 187 185 04 0,76 0,73 04 111 110 05 0,77 0,79 05 49 49 06 1,38 1,36 06 199 196 07 1,85 1,84 07 143 146 08 0,86 0,86 08 369 361 09 4,68 4,66 09 122 122 10 1,33 1,51 10 77 78 11 0,89 0,89 11 259 255 12 0,71 0,74 12 74 74 13 1,18 1,14 13 140 138 14 1,52 1,48 14 105 101 15 0,54 0,55 15 362 359 16 1,17 1,13 16 171 167 17 1,65 1,66 17 1090 1097 18 2,22 2,11 18 380 384 19 1,83 1,86 19 1160 1153 20 1,22 1,22 20 285 287 21 1,84 1,82 21 430 433 22 1,21 1,15 22 205 205 23 1,09 1,1 23 1014 1012 24 9,21 9,23 24 283 276 25 2,12 2,14 25 194 199 26 0,93 0,95 26 551 551 27 5,14 5,19 27 730 731 28 2,35 2,33 28 856 863 29 1,62 1,62 29 270 271 30 2,10 2,10 30 247 249 63 Analito: Creatinina Analito: Triglicéridos Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 31 5,97 6,02 31 368 364 32 0,59 0,56 32 245 249 33 10,84 10,77 33 177 181 34 9,48 9,51 34 590 585 35 0,25 0,25 35 204 207 36 1,31 1,31 36 546 543 37 7,60 7,34 37 320 325 38 2,03 2,04 38 346 351 39 9,05 9,06 39 298 292 40 7,58 7,35 40 468 467 Analito: Colesterol total Analito: HDL colesterol Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 01 72 73 01 9 9 02 101 102 02 19 18 03 114 113 03 12 11 04 71 70 04 12 11 05 58 59 05 21 21 06 141 143 06 35 36 07 119 116 07 36 36 08 272 274 08 50 49 09 79 78 09 22 22 10 105 103 10 19 19 11 199 199 11 49 49 12 97 96 12 35 34 13 172 168 13 41 41 14 71 71 14 18 16 15 275 273 15 59 57 16 122 120 16 32 32 17 357 361 17 100 99 18 205 202 18 27 27 19 263 260 19 92 92 20 214 218 20 12 12 21 551 551 21 45 45 22 373 370 22 42 41 23 239 238 23 40 40 24 263 263 24 77 75 25 260 256 25 7 7 64 Analito: Colesterol total Analito: HDL colesterol Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 26 128 129 26 40 40 27 221 218 27 74 75 28 240 241 28 92 92 29 205 201 29 21 22 30 273 275 30 65 65 31 216 218 31 83 82 32 343 343 32 67 68 33 66 66 33 87 88 34 306 306 34 43 43 35 316 322 35 54 52 36 352 353 36 25 25 37 47 47 37 32 34 38 136 138 38 28 28 39 330 328 39 15 15 40 416 415 40 23 24 Analito: Ácido úrico Analito: Sodio Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mmol/L) (mmol/L) 01 1,9 1,9 01 130,0 130,1 02 6,6 6,6 02 136,0 135,9 03 3,7 3,7 03 120,2 120,7 04 2,0 2,0 04 132,7 132,9 05 2,4 2,4 05 131,0 131,2 06 4,2 4,3 06 132,5 132,7 07 9,1 9,3 07 135,4 136,3 08 7,3 7,4 08 137,4 135,5 09 15,2 14,9 09 132,9 132,2 10 5,8 5,9 10 128,4 128,5 11 4,7 4,6 11 136,6 137,0 12 1,6 1,6 12 130,9 131,7 13 8,0 8,0 13 138,7 139,7 14 2,3 2,4 14 132,4 132,5 15 3,6 3,6 15 133,3 132,9 16 4,8 4,9 16 133,5 133,8 17 7,5 7,6 17 129,8 130,2 18 9,9 9,9 18 137,6 137,7 19 7,3 7,4 19 138,6 137,9 20 3,4 3,9 20 128,4 128,3 65 Analito: Ácido úrico Analito: Sodio Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mmol/L) (mmol/L) 21 9,0 9,0 21 128,8 128,5 22 1,7 1,8 22 151,0 151,2 23 10,0 9,9 23 136,2 136,0 24 7,3 7,4 24 137,9 137,7 25 10,1 10,4 25 136,4 135,7 26 7,4 7,4 26 130,1 130,8 27 7,1 7,1 27 135,2 135,9 28 4,5 4,6 28 109,3 109,3 29 12,1 12,0 29 128,8 129,3 30 8,8 8,8 30 136,2 136,2 31 3,4 3,6 31 125,0 124,6 32 6,0 6,0 32 128,5 128,6 33 11,4 11,4 33 125,2 125,0 34 7,1 7,2 34 126,4 126,3 35 3,8 4,0 35 127,8 128,0 36 3,5 3,5 36 134,3 135,4 37 6,6 6,8 37 130,1 131,0 38 2,9 2,9 38 132,6 133,6 39 4,9 4,6 39 140,9 140,9 40 5,4 5,5 40 138,3 137,0 Analito: Cloruro Analito: Potasio Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mmol/L) (mmol/L) (mmol/L) (mmol/L) 01 96,1 96,8 01 3,48 3,33 02 109,0 108,8 02 4,15 4,19 03 99,0 99,0 03 4,40 4,48 04 94,3 94,7 04 3,93 3,90 05 97,2 97,6 05 4,01 3,94 06 97,7 97,1 06 4,33 4,35 07 94,1 94,6 07 3,91 3,89 08 100,1 99,7 08 4,60 4,50 09 100,5 100,0 09 3,95 3,96 10 97,5 97,9 10 4,86 4,93 11 103,5 103,9 11 4,10 3,99 12 94,0 94,1 12 4,01 4,17 13 106,7 107,2 13 4,38 4,41 14 96,9 98,0 14 4,97 4,91 15 101,8 101,5 15 3,54 3,64 66 Analito: Cloruro Analito: Potasio Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mmol/L) (mmol/L) (mmol/L) (mmol/L) 16 97,6 98,0 16 4,52 4,48 17 95,4 95,5 17 5,68 5,59 18 102,3 103,0 18 2,74 2,83 19 95,5 96,0 19 4,49 4,60 20 94,9 95,7 20 4,50 4,54 21 121,2 121,1 21 4,42 4,40 22 102,1 102,0 22 4,24 4,34 23 100,2 100,9 23 4,40 4,07 24 105,3 105,2 24 4,73 4,72 25 93,5 94,0 25 4,21 4,29 26 102,6 102,8 26 2,97 3,06 27 73,9 73,2 27 4,80 4,79 28 99,1 99,5 28 4,65 4,60 29 100,3 100,6 29 4,13 4,19 30 90,0 91,0 30 3,45 3,42 31 88,7 88,8 31 4,11 4,13 32 90,7 90,5 32 3,10 3,04 33 103,6 105,6 33 5,85 5,75 34 99,5 99,8 34 4,40 4,50 35 91,7 93,0 35 4,19 4,06 36 94,8 94,8 36 5,78 5,83 37 106,5 106,2 37 4,31 4,20 38 100,8 100,5 38 4,12 4,12 39 103,0 103,1 39 3,11 3,24 40 96,2 96,3 40 3,25 3,29 Analito: Calcio Analito: Magnesio Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 01 7,80 7,80 01 1,63 1,65 02 6,30 6,40 02 1,86 1,90 03 7,80 7,80 03 1,92 1,93 04 8,00 7,90 04 1,72 1,74 05 7,70 7,70 05 1,54 1,58 06 9,20 9,20 06 2,12 2,12 07 10,00 9,90 07 1,80 1,76 08 9,90 9,80 08 2,12 1,96 09 8,10 8,00 09 2,52 2,46 10 7,80 7,80 10 1,86 1,86 67 Analito: Calcio Analito: Magnesio Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 11 9,40 9,30 11 2,07 2,07 12 8,00 7,90 12 1,69 1,74 13 8,80 8,70 13 1,92 1,92 14 7,20 7,00 14 1,59 1,66 15 8,80 8,90 15 1,84 1,86 16 9,10 8,90 16 1,81 1,83 17 10,00 9,80 17 2,32 2,38 18 9,50 9,50 18 2,38 2,39 19 6,20 6,20 19 2,91 2,85 20 9,10 9,00 20 1,96 1,98 21 8,40 8,30 21 2,00 2,05 22 8,60 8,60 22 1,80 1,83 23 8,40 8,40 23 1,73 1,73 24 8,10 8,10 24 1,69 1,66 25 8,60 8,70 25 1,74 1,77 26 7,70 7,70 26 1,87 1,88 27 8,20 8,20 27 1,59 1,54 28 6,60 6,40 28 2,58 2,56 29 9,80 9,80 29 2,01 1,98 30 7,60 7,50 30 1,69 1,73 31 9,10 9,20 31 1,73 1,76 32 9,00 9,00 32 2,07 2,09 33 9,70 9,60 33 2,13 2,12 34 7,90 7,80 34 1,69 1,74 35 8,40 8,20 35 2,99 2,99 36 9,40 9,20 36 1,99 1,96 37 8,30 8,30 37 1,64 1,62 38 8,30 8,20 38 3,23 3,20 39 6,10 6,10 39 2,76 2,76 40 7,10 7,10 40 2,82 2,80 Analito: Fósforo Analito: Bilirrubina Total Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 01 6,30 6,30 01 1,8 1,8 02 2,90 2,90 02 0,2 0,2 03 3,70 3,80 03 1,0 1,0 04 2,90 2,90 04 0,6 0,6 05 2,90 2,60 05 0,9 0,9 68 Analito: Fósforo Analito: Bilirrubina Total Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) 06 2,70 2,70 06 0,8 0,8 07 4,10 4,00 07 0,5 0,5 08 2,90 3,00 08 1,0 1,1 09 7,50 7,50 09 0,7 0,6 10 2,70 2,70 10 3,6 3,6 11 3,50 3,50 11 0,4 0,4 12 3,20 3,20 12 0,7 0,7 13 3,00 3,00 13 0,6 0,6 14 5,00 4,90 14 0,8 0,8 15 3,80 3,70 15 0,4 0,4 16 3,70 3,60 16 0,9 0,9 17 3,80 3,60 17 2,7 2,7 18 4,00 3,90 18 2,2 2,3 19 7,90 7,80 19 1,4 1,4 20 3,50 3,40 20 5,3 5,3 21 3,10 3,10 21 1,2 1,0 22 4,10 4,20 22 1,4 1,4 23 4,40 4,40 23 1,2 1,2 24 3,20 3,20 24 0,6 0,6 25 2,60 2,60 25 2,4 2,4 26 2,40 2,40 26 1,1 1,0 27 2,60 2,60 27 0,6 0,6 28 3,90 4,00 28 1,3 1,3 29 3,30 3,30 29 1,4 1,3 30 6,20 6,40 30 5,6 5,6 31 4,20 4,20 31 3,6 3,6 32 4,20 4,20 32 4,2 4,2 33 2,90 2,90 33 2,0 2,0 34 4,10 4,20 34 3,3 3,2 35 6,10 6,10 35 1,0 1,0 36 9,20 9,10 36 0,5 0,5 37 8,50 8,50 37 0,8 0,9 38 5,30 5,20 38 1,9 1,9 39 4,10 4,00 39 5,6 5,6 40 5,70 5,70 40 2,2 2,2 69 Analito: AST Analito: ALT Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (U/L) (U/L) (U/L) (U/L) 01 123 120 01 57 56 02 30 30 02 10 10 03 18 17 03 15 14 04 45 44 04 29 29 05 15 15 05 13 14 06 29 30 06 19 20 07 12 13 07 11 11 08 27 29 08 39 39 09 16 17 09 14 14 10 154 156 10 40 38 11 26 28 11 22 22 12 19 19 12 11 10 13 26 28 13 18 19 14 16 21 14 19 19 15 12 14 15 11 12 16 17 17 16 12 11 17 66 66 17 109 106 18 49 49 18 86 88 19 603 598 19 491 494 20 74 77 20 130 130 21 51 54 21 54 56 22 71 74 22 22 22 23 145 153 23 317 321 24 54 55 24 70 70 25 80 79 25 55 56 26 96 95 26 100 101 27 32 35 27 68 60 28 57 60 28 120 123 29 110 113 29 193 186 30 236 233 30 385 387 31 415 413 31 265 265 32 221 220 32 340 340 33 365 365 33 318 318 34 142 143 34 203 205 35 423 425 35 300 300 36 200 200 36 32 29 37 342 340 37 426 423 38 215 215 38 203 201 39 327 325 39 198 198 40 513 515 40 326 324 70 Analito: ALP Analito: GGT Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (U/L) (U/L) (U/L) (U/L) 01 251 260 01 264 266 02 62 63 02 16 14 03 186 192 03 127 124 04 90 83 04 39 38 05 86 85 05 23 23 06 44 46 06 33 33 07 34 32 07 15 15 08 52 52 08 26 25 09 65 66 09 34 34 10 268 276 10 76 75 11 82 76 11 48 47 12 95 99 12 50 52 13 62 60 13 34 34 14 76 84 14 36 36 15 96 92 15 9 10 16 78 79 16 48 47 17 132 125 17 579 587 18 304 300 18 684 690 19 147 145 19 251 255 20 147 143 20 169 170 21 244 244 21 121 121 22 749 747 22 32 32 23 660 658 23 29 31 24 129 133 24 78 79 25 132 125 25 107 109 26 237 234 26 33 35 27 135 135 27 178 179 28 117 117 28 28 28 29 61 64 29 615 618 30 217 221 30 423 425 31 143 142 31 275 280 32 241 249 32 100 100 33 196 192 33 35 37 34 327 329 34 512 514 35 162 163 35 320 325 36 60 61 36 118 115 37 152 158 37 412 412 38 765 762 38 330 325 39 582 580 39 110 113 40 476 480 40 208 210 71 Analito: LDH Analito: Proteínas totales Tubo con gel Tubo sin gel Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador Muestra separador separador (U/L) (U/L) (g/dL) (g/dL) 01 291 281 01 6,60 6,50 02 239 229 02 3,20 3,10 03 169 172 03 4,80 4,70 04 325 321 04 6,10 6,00 05 155 136 05 5,40 5,40 06 207 199 06 6,40 6,40 07 139 137 07 7,60 7,40 08 164 159 08 7,70 7,60 09 115 130 09 5,80 5,70 10 265 268 10 7,10 7,00 11 147 147 11 7,40 7,30 12 273 277 12 5,10 5,00 13 163 180 13 5,90 5,90 14 271 252 14 4,30 4,20 15 130 142 15 6,30 6,10 16 159 152 16 6,40 6,20 17 684 683 17 3,40 3,10 18 231 241 18 7,70 7,60 19 252 256 19 4,90 4,90 20 925 936 20 6,90 6,90 21 363 373 21 7,00 6,90 22 951 956 22 5,40 5,40 23 356 372 23 3,60 3,60 24 161 178 24 6,90 6,80 25 1137 1129 25 8,50 8,60 26 241 239 26 6,70 6,50 27 296 309 27 5,90 5,90 28 183 192 28 6,50 6,40 29 388 400 29 9,10 9,00 30 529 527 30 4,20 4,20 31 580 589 31 5,20 5,10 32 591 604 32 4,30 4,30 33 129 140 33 7,90 7,80 34 110 116 34 6,90 6,90 35 149 141 35 5,30 5,30 36 201 211 36 7,00 7,10 37 291 314 37 6,60 6,70 38 340 333 38 8,80 8,90 39 233 241 39 7,20 7,20 40 209 212 40 6,00 6,00 72 Analito: Albúmina Tubo con gel Tubo sin gel Muestra separador separador (g/dL) (g/dL) 01 2,42 2,45 02 1,07 1,07 03 1,47 1,49 04 2,33 2,30 05 2,39 2,44 06 3,25 3,31 07 4,19 4,13 08 4,48 4,46 09 2,60 2,59 10 1,99 1,99 11 4,45 4,48 12 2,19 2,21 13 3,32 3,26 14 1,77 1,74 15 3,18 3,17 16 3,66 3,55 17 0,94 0,96 18 2,12 2,10 19 2,11 2,15 20 3,04 3,09 21 2,68 2,65 22 2,93 2,92 23 1,65 1,65 24 3,18 3,22 25 4,35 4,38 26 3,16 3,13 27 2,81 2,80 28 2,48 2,34 29 4,80 4,80 30 4,96 4,98 31 2,37 2,35 32 5,00 5,02 33 3,12 3,10 34 3,10 3,00 35 4,27 4,25 36 5,23 5,25 37 1,97 1,97 38 3,47 3,46 39 4,00 4,00 40 2,23 2,20 73 Anexo 3. Resultados obtenidos de las estadísticas de regresión lineal, al comparar 21 analitos en muestras recolectadas en tubos con gel y sin gel separador. Analito Coeficiente de Coeficiente de correlación determinación S y·x Pendiente Intercepto Glucosa 0,9998 0,9995 2,63 0,9976 2,3232 (0,9902 a 1,005) (0,7692 a 3,877) Nitrógeno 0,9996 0,9992 1,36 1,0065 -0,0703 Ureico (0,9970 a 1,0160) (-0,6822 a 0,5415) Creatinina 0,9997 0,9995 0,07 1,0062 -0,0054 (0,9987 a 1,0137) (-0,0356 a 0,0248) Triglicéridos 0,9999 0,9998 3,93 0,9996 0,3690 (0,9950 a 1,004) (-1,6580 a 2,396) Colesterol Total 0,9998 0,9996 2,32 0,9982 0,6512 (0,9917 a 1,0047) (-0,8916 a 2,1940) HDL colesterol 0,9994 0,9988 0,92 1,0013 0,1466 (0,9897 a 1,0129) (-0,4157 a 0,7090) Ácido úrico 0,9991 0,9982 0,14 1,0097 -0,1072 (0,9957 a 1,0237) (-0,2039 a -0,0106) Sodio 0,9956 0,9912 0,62 1,0015 -0,2887 (0,9705 a 1,0326) (-4,4062 a 3,8289) Cloruro 0,9971 0,9943 0,54 0,9961 0,1281 (0,9714 a 1,0209) (-2,3220 a 2,5782) Potasio 0,9907 0,9814 0,10 1,0132 -0,0531 (0,9674 a 1,0589) (-0,2484 a 0,1423) Calcio 0,9964 0,9928 0,09 1,0085 -0,0184 (0,9804 a 1,0367) (-0,2535 a 0,2168) Magnesio 0,9956 0,9912 0,04 1,0264 -0,0558 (0,9946 a 1,0583) (-0,1219 a 0,0103) Fósforo 0,9987 0,9973 0,09 0,9989 0,0247 (0,9818 a 1,0159) (-0,0529 a 0,1023) Bilirrubina Total 0,9994 0,9987 0,05 0,9984 0,0102 (0,9866 a 1,0102) (-0,0162 a 0,0365) AST 0,9999 0,9998 2,21 1,0058 -1,5007 (1,0011 a 1,0105) (-2,4581 a -0,5434) ALT 0,9999 0,9997 2,33 0,9981 0,5002 (0,9926 a 1,0035) (-0,5268 a 1,5273) ALP 0,9997 0,9995 4,35 1,0007 -0,3929 (0,9932 a 1,0082) (-2,4560 a 1,6701) GGT 0,9999 0,9999 2,09 0,9926 0,2783 (0,9890 a 0,9963) (-0,6268 a 1,1833) LDH 0,9991 0,9983 10,2 0,9984 -2,7993 (0,9848 a 1,0121) (-8,2750 a 2,6765) 74 Analito Coeficiente de Coeficiente de correlación determinación S y·x Pendiente Intercepto Proteínas totales 0,9981 0,9962 0,09 0,9874 0,1373 (0,9674 a 1,0074) (0,0111 a 0,2636) Albúmina 0,9993 0,9985 0,04 0,9980 0,0139 (0,9855 a 1,0106) (-0,0263 a 0,0541)